CUEDC2在糖尿病肾病EMT发生中的作用及机制研究

Diabetic nephropathy (DN) is common and refractory microvascular complication of diabetic. It is known that TGF-β-mediated epithelial-mesenchymal transition of renal tubular epithelial cells plays a key role in the development of diabetic nephropathy. But there have been not strategies based on the EMT to treat DN in clinical recently. CUEDC2 is a new protein, recent studies report that it can inhibit the activation of NF-kB signaling pathway, thus involved in the suppression of inflammation, cancer and autoimmune diseases (Nature Immunology, 2008). In preliminary studies, we found CUEDC2 was low expression specially in renal tissue of type 2 diabetic nephropathy, and overexpression CUEDC2 could inhibit the transcriptional activation of TGF-β signaling pathway. So we proposed to research the role and mechanism of CUEDC2 in EMT occurring in diabetic nephropathy further. The main strategy is to research the effect of CUEDC2 and its interacting proteins on TβRI receptor dephosphorylation by kinase experiments in vitro and phosphorylation experiments in vitro / in vivo. These efforts may find a new molecular mechanism of negative regulation for TGF-β/Smads pathway, and provide new ideas and methods for prevention and treatment of diabetic nephropathy.

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见且难治的微血管并发症，TGF-β介导的肾小管上皮细胞-间质转化（EMT）在DN发病中起关键作用，但目前研究尚未开拓基于EMT治疗DN的策略。CUEDC2是一个新蛋白质，新近研究发现它能够抑制NF-kB信号通路的激活，进而参与抑制炎症反应、肿瘤及自身免疫性疾病等（Nature Immunology, 2008）。我们在前期研究中，发现CUEDC2在2型DN肾组织中呈特异性低表达，上调CUEDC2能够明显抑制TGF-β信号通路的转录激活，遂提出进一步研究CUEDC2在糖尿病肾病EMT发生中的作用及机制。主要策略是通过体外激酶实验和体外/体内去磷酸化实验，研究CUEDC2与其相互作用蛋白对 TβRI受体去磷酸化的影响。以上努力将可能发现一种新的负调控TGF-β/Smads通路的分子机制，为临床防治糖尿病肾病提供新的思路和方法。

糖尿病肾病（Diabetic nephropathy, DN）是糖尿病常见且难治的微血管并发症。现有研究表明，肾小管间质纤维化是DN进展为ESRD的主要病理基础，上皮-间质细胞转化（Epithelial- mesenchymal transition，EMT）被认为是肾间质纤维化发生发展的核心环节之一。TGF-β是导致DN的关键性因子，可以启动肾小管上皮细胞EMT的发生发展。.本研究发现CUEDC2在2型DN肾组织中呈特异性低表达，并且能够抑制肾小管上皮细胞TGF-β信号通路的转录激活，遂提出进一步研究CUEDC2在糖尿病肾病EMT发生中的作用及机制，为阐明糖尿病肾病肾纤维化发生的分子机制提供实验依据。.本研究重要研究结果：.1．CUEDC2在DN肾组织中表达明显下调，TGF-β1 下调 CUEDC2 的表达呈时间依赖性，并且过表达 CUEDC2能抑制TGF-β/Smads信号通路的激活。.2. TGF-β1刺激的条件下，过表达CUEDC2，能下调p-Smad2和p-Smad3表达，并且能下调间充质的marker：Fibronectin和vimentin的表达，而E-cadherin的表达上调，相反干涉CUEDC2的表达，结果相反，充分表明过表达/干涉 CUEDC2 能抑制/促进 TGF-β/Smads 信号通路及 TGF-β1 诱导的EMT。.3. CUEDC2与Smad7存在内源性及外源性相互作用，TGF-β1刺激能促进这一相互作用，表明CUEDC2能介导Smad7使TGF-β的I型受体（TβRI）去磷酸化失活，从而负调控TGF-β/Smads信号通路，发挥抑制糖尿病肾病EMT的作用。.4. 动物体内上调 CUEDC2 的表达，可明显降低db/db小鼠的体重、血糖、胆固醇和尿白蛋白的排泄。CUEDC2可明显下调Fibronectin和collagen I的表达，抑制肾脏纤维化，具有治疗作用。