结核分枝杆菌RD区新功能性蛋白Rv1768（PE_PGRS31）的抗原性鉴定及其介导的逃逸机制的探讨

Mycobacterium tuberculosis (MTB) RD region protein was an important target in TB diagnosis, there are still many RD protein antigenicity and diagnostic value has not been revealed. MTB can evade the killing of macrophages, but the role of RD protein played in the mechanism was still unkown. In our previous study, we have screened one dominant secreted protein Rv1768 which can induce high level of IFN-γ (J infect，2015), we also found it can resistant the killing of macrophage and its target was Annexin A2 from mcrophage. In our next study, we will further evaluate and explor the antigenicity and escape mechanism of Rv1768 by challenged in mice, T-SPOT, westernblot (WB), confocal, FCM ( flow cytometry ) and so on methods. This study was expected provide more reference informations for TB diagnosis and pathogenic mechanism invesigation. We hope this study will also provide a new target and ideal for the study of TB prevention and treatment in the future.

结核分枝杆菌（MTB）RD区蛋白是结核（TB）诊断的重要靶标，仍有许多RD蛋白的抗原性及诊断价值未被揭示；MTB能逃避巨噬细胞杀伤，但RD蛋白在该机制中发挥的作用尚不清楚。本研究前期工作已从受试RD蛋白中筛选出诱导INF-γ高表达的Rv1768（PE_PGRS31）蛋白（J infect，2015），并发现其为分泌型蛋白且具备抗巨噬细胞杀伤功能，作用靶点为巨噬细胞Annexin A2蛋白。本研究将进一步利用动物攻毒实验、T-SPOT、Westernblot（WB）、共聚焦（Confocal）、流式（FCM）等方法进一步鉴定和探讨该蛋白的抗原性及其介导的逃逸机制。预期为TB的诊断及致病机制探讨提供更多的参考依据，为今后TB的预防与治疗提供新的靶点与研究思路。

结核病（TB）是人类健康的重要威胁，WHO的2016全球结核病报道显示仍有约1/3人感染过结核（MTB），5-10%会发展为活动性结核（ATB），余者以潜伏感染（LTBI）形式存在。RD区蛋白是TB诊断的重要靶标，仍有许多RD蛋白的抗原性及诊断价值未被揭示；MTB能逃避巨噬细胞杀伤，但RD蛋白在该机制中发挥的作用尚不清楚。本研究一方面要验证通过平行筛选得到的RD14区的Rv1768蛋白的抗原性，进一步评估其在TB诊断中的应用价值；另一方面探索Rv1768所介导的MTB逃逸机制，欲进一步揭示MTB的致病性。本研究结果显示Rv1768 具备强抗原性且其在TB 患者特异性IFN-γ水平与明显高于HD（健康捐献者），具有潜在的诊断应用价值，其诊断灵敏度与特异度可高达91.38%及96.83%，其诊断ROC曲线下面积AUC值高达0.96183。同时发现Rv1768 与巨噬细胞Annexin A2 蛋白结合并抑制其表达，继而下调胞内Ca2+浓度抑制吞噬溶酶体成熟介导MTB 逃逸。本项目的研究成果为TB的预防及治疗提供新的靶点和研究思路。