CD147作为胶质瘤抗血管治疗疗效评价标志物的研究

Glioma is the most common malignant tumor of central nervous system. Anti-angiogenesis therapy targeting VEGF is a new therapy of gliomas in addition to surgery,radiation and chemotherapy, but lacking of exact molecular markers to guide the individual application of antiangiogenesis therapy is one of the most important problems.A latest report pointed out that MMP - 2 may forecast the therapy of bevacizumab, an antiangiogenesis drug targeting VEGF,in recurrent malignant gliomas. Our previous studies found that CD147 is an independent prognostic factor of glioblastoma patients, and CD147 is a key molecule in generating and controling the expression of MMP-2 and VEGF, so we assume that CD147 may act as an important molecular marker in evaluating the efficacy of antiangiogenesis therapy in glioma. In this study,we intend to establish CD147 over-expression or silent glioma cell lines and animal models, intervene with different concentrations of bevacizumab, look into the impact of different CD147 expression level in cell activity, cell cycle and invasive after treated with bevacizumab; measure the change of tumor size, and the expression of MMP - 2 and VEGF before and after treatment of bevacizumab, evalute the influence of different CD147 expression levels in tumor suppression and anti-angiogenesis after treated with bevacizumab.After all, we would like to explore the possible mechanism and signal pathways. This study is expected to provide theoretical basis for clinical application of CD147 as an important molecular marker in evaluating the efficacy of bevacizumab in gliomas, and better guide individualized targeting antiangiogenesis therapy.

胶质瘤是神经系统最常见的恶性肿瘤，贝伐单抗靶向VEGF抗血管生成治疗是胶质瘤手术及放化疗后的新疗法，但不同患者对贝伐单抗的治疗反应性不同，而目前仍缺少确切的分子病理标志物来指导个体化的抗血管治疗。最新报道指出MMP-2可能预测复发恶性胶质瘤贝伐单抗的疗效，我们的前期研究发现CD147是胶质母细胞瘤患者独立的预后不良因素，而且CD147是MMP-2和VEGF生成及调控的关键分子，因此我们预测CD147分子可以作为胶质瘤抗血管治疗疗效评价的重要分子标志物。本研究拟建立CD147过表达和沉默的胶质瘤细胞系及动物模型，用不同浓度贝伐单抗进行干预，观察不同CD147表达水平对贝伐单抗作用后肿瘤侵袭性及恶性表型的变化以及与MMP-2、VEGF等的关系，最终探究其可能的作用机制及信号传导通路。本研究有望为临床应用CD147作为贝伐单抗疗效评价的重要分子标志物提供理论依据，更好的指导个体化靶向抗血管治疗。

胶质瘤是神经系统最常见的恶性肿瘤，贝伐单抗靶向VEGF抗血管生成治疗是胶质瘤手术及放化疗后的新疗法，但不同患者对贝伐单抗的治疗反应性不同，而目前仍缺少确切的分子病理标志物来指导个体化的抗血管治疗。有报道指出MMP-2可能预测复发恶性胶质瘤贝伐单抗的疗效，我们的前期研究发现CD147是胶质母细胞瘤患者独立的预后不良因素，而且CD147是MMP-2和VEGF生成及调控的关键分子，因此我们预测CD147分子可以作为胶质瘤抗血管治疗疗效评价的重要分子标志物。针对这一问题，我们首先利用Western blot的方法检测了胶质瘤细胞系、不同病理分级的胶质瘤组织及癌旁组织中CD147蛋白质的表达情况，发现胶质瘤癌旁组织中几乎检测不到CD147的表达，而胶质瘤细胞系U87和U251及不同分级的胶质瘤组织中均有CD147的高表达，提示该分子与胶质瘤的临床病理级别的相关性；之后我们通过慢病毒感染加药物筛选的方式构建了稳定表达CD147的胶质瘤细胞系，Western blot和Real time-PCR验证了CD147的过表达状况，利用细胞划痕实验检测，发现过表达CD147可以显著促胶质瘤细胞的体外迁移能力，Edu掺入实验则证实过表达CD147促进胶质瘤细胞的体外增殖能力和细胞增殖；此外，我们将对照和CD147过表达的胶质瘤细胞分别皮下荷瘤裸鼠，从第7天开始每隔一周测量肿瘤大小，直至第42天，发现从28天起过表达CD147的实验组肿瘤生长较对照组有明显增加，第42天分离肿瘤块，可见CD147过表达的肿瘤表面有着更为丰富的血管网；分别利用免疫组化和免疫荧光技术检测肿瘤细胞增殖标志物Ki67的表达，发现过表达CD147显著促进胶质瘤细胞的体内增殖能力；进一步利用免疫荧光的方法检测血管内皮标记物CD31的表达情况，结果显示过表达CD147提高胶质瘤的体内血管形成能力。上述实验结果不仅提供了CD147高表达与胶质瘤恶性转化相关的证据，还为将CD147的表达水平作为评估胶质瘤对贝伐单抗治疗效果的标志物提供了一定的依据。