AS160对上皮细胞钠通道（ENaC）转运调控的分子机制研究

远端肾单位上皮细胞膜上的钠离子通道 (ENaC) 的主要功能是介导钠离子的跨膜转运，调节水钠平衡并稳定血压。ENaC功能失调会引起机体血压调节障碍。ENaC表达调控的分子机制目前尚不清楚。我们发表的数据证明14-3-3蛋白通过与磷酸化靶蛋白结合，稳定其磷酸化状态来参与调控ENaC表达转运。应用14-3-3蛋白亲和层析及蛋白质组分析我们筛选出多个新的14-3-3蛋白结合的靶蛋白，AS160是其中之一。本课题的主要目的就是证明AS160参与肾脏集合管上皮细胞中ENaC转运的调控并探讨其分子机制。我们将通过体外实验从AS160磷酸化修饰、AS160 和ENaC在细胞内的共定位分布等方面深入阐述AS160对ENaC调控的分子机制。利用AS160敲除小鼠在体观察AS160对ENaC细胞膜转运的调控作用。本课题的完成将为研究机体对钠离子重吸收开拓新的思路，为发现高血压新的治疗靶点奠定新的理论基础。

肾脏远端肾单位上皮细胞膜上的钠离子通道 (ENaC) 的主要功能是介导钠离子的跨膜转运，调节水钠平衡并稳定血压。ENaC功能失调会引起人体血压调节障碍。ENaC表达调控的分子机制目前尚不清楚。我们发表的数据证明14-3-3蛋白通过与磷酸化靶蛋白结合，稳定其磷酸化状态来参与调控ENaC表达转运。应用14-3-3蛋白亲和层析及蛋白质组分析我们筛选出多个新的14-3-3蛋白结合的靶蛋白，AS160是其中之一。本课题的主要目的就是证明AS160是否参与肾脏集合管上皮细胞中ENaC转运的调控并探讨其分子机制。实验结果表明AS160参与醛固酮对ENaC的调控。内源性的AS160的生理作用主要是将ENaC稳定在细胞内的特定compartment内；而在醛固酮的刺激，一方面增加AS160的磷酸化，同时还加强了14-3-3与磷酸化AS160的结合，使AS160稳定发挥其功能，促进大量ENaC快速转运到细胞膜上，增加钠离子的重吸收。本课题的完成为研究机体对钠离子重吸收开拓新的思路，为发现高血压新的治疗靶点奠定新的理论基础。