油菜高亲和硼吸收转运基因的克隆、表达及其利用硼的功能研究

硼是植物必需的矿质营养元素。长期以来学术界认为硼是以被动吸收为主的，有关植物存在主动吸收硼的观点依然缺乏直接的证据。本项目研究在利用我们已克隆并经过初步验证的Bn190基因，构建植物转化载体转化拟南芥和油菜，开展增强表达和抑制表达研究的同时，以油菜硼高效品种为材料，构建低硼胁迫诱导下的抑制差减杂交文库（SSH文库），分离低硼胁迫下显著表达的硼吸收转运蛋白基因和转基因功能验证。利用Real-time PCR、Northern杂交、蛋白质印迹免疫、激光扫描共聚焦显微技术检测、以及植株器官硼含量分析等方法，研究转基因植株目标基因mRNA、蛋白质的表达水平和相应的表达组织、器官，及其与硼高效吸收利用的关系。研究结果将获得低硼胁迫下显著表达的高亲和硼吸收转运蛋白基因，为揭示植物主动吸收硼的机制提供直接依据（基因及其表达模式），并为油菜等作物硼营养性状的改良提供基础。