长链非编码RNA-CoroMarker的促炎机制及与冠心病严重程度和预后的关系研究

NF-κB / NLRP3 signaling pathway,regulatig inflammatory response, plays an important role in the development and progression of atherosclerosis. Long non-coding RNA (lncRNAs) has become a hot topic in the field of coronary heart disease. It was found that lncRNAs could regulate NF-κB / NLRP3 signaling pathway. CoroMarker is a recently discovered lncRNA whose plasma level is significantly elevated in patients with coronary heart disease and becomes a specific biomarker for early diagnosis of coronary heart disease. CoroMarker promotes the expression of inflammatory cytokines and may be involved in the development of coronary heart disease, but the proinflammatory mechanism and the relationship with the severity and prognosis of coronary heart disease remains unclear. The project intends to elucidate the proinflammatory mechanism of CoroMarker at the cellular level, confirming that the NF-κB / NLRP3 signaling pathway may mediates the proinflammatory effect of CoroMarker. In addition, in patients with coronary heart disease, we intend to detect the plasma CoroMarker expression level and analyze the relationship with coronary stenosis, atherosclerotic plaque stability, and major cardiovascular events, aiming to elucidate whether plasma CoroMarker expression level can reflect the severity of coronary heart disease and has a prognostic value.

NF-κB/ NLRP3信号通路介导的炎症反应在动脉粥样硬化的发生及发展过程中起着重要作用。长链非编码RNA（lncRNAs）目前已成为冠心病领域的研究热点。研究发现lncRNAs可调控NF-κB/ NLRP3信号通路。 CoroMarker是最近发现的一种lncRNA, 其血浆水平成为冠心病早期诊断的一个特异的生物标志物，CoroMarker能促进炎性因子的表达，可能参与了冠心病的发生及发展，但促炎机制及与冠心病严重程度和预后的关系仍不明确。本项目拟在细胞水平阐明CoroMarker的促炎机制，证实NF-κB/ NLRP3信号通路介导了CoroMarker的促炎作用。另外，在冠心病人群中，通过检测血浆CoroMarker表达水平，分析与冠脉狭窄程度、粥样斑块稳定性以及主要心血管不良事件的关系，证实血浆CoroMarker水平可反映冠心病严重程度并对预后具有预测价值。

NF-κB/ NLRP3信号通路介导的炎症反应在动脉粥样硬化的发生及发展过程中起着重要作用。长链非编码RNA（lncRNAs）目前已成为冠心病领域的研究热点。研究发现lncRNAs可调控NF-κB/ NLRP3信号通路。 CoroMarker是最近发现的一种lncRNA, 它可能参与了冠心病的发生及发展，但机制仍不明确。本项目拟在细胞水平阐明CoroMarker的促炎机制，并证实NF-κB/ NLRP3信号通路介导了CoroMarker的促炎作用。HUVECs 和 THP-1 细胞给予ox-LDL诱导刺激后，q-PCR、ELISA和western blot检测炎症因子水平（IL-1β, IL-6 和TNF-α）），ELISA检测氧化应激水平（MDA, SOD,SOS）, 细胞流式学检测细胞凋亡水平，并同时PCR检测CoroMarker的表达水平。siRNA干扰CoroMarker的表达后，观察炎症因子、氧化应激、细胞凋亡水平的变化。最后探索CoroMarker的表达水平降低后，NF-κB/NLRP3 信号传导相关蛋白 (p-NF-κB, p-IkBα and NLRP3)的表达变化。研究结果我们首先观察到ox-LDL可以显著的导致HUVECs 和 THP-1 细胞的损伤，主要表现为氧化应激水平升高（MDA, SOD,SOS），凋亡水平升高以及促进炎症因子的释放（(IL-1β, IL-6 和TNF-α）；同时CoroMarker的表达水平明显升高和NF-κB通路的激活。抑制CoroMarker的表达后，可以延缓ox-LDL导致的炎症因子释放、氧化应激水平增加以及细胞凋亡。进一步研究证实CoroMarker基因敲低后，可以显著地抑制NF-κB/NLRP3 信号传导相关蛋白的表达。我们的研究证实抑制CoroMarker的表达后，可以延缓ox-LDL导致的细胞炎症损伤，其机制可能与NF-κB/NLRP3 信号通路有关。因此，CoroMarker/NF-κB/NLRP3 信号通路可能是动脉粥样硬化的一个新的干预靶点。