长链非编码RNA SNHG7调控乳腺癌化疗耐药的机制

Breast cancer is the most common malignant tumor in women, and chemoresistance is a major clinical obstacle that limits the efficacy of breast cancer treatment.Increasing evidence indicated that chemoresistance of breast cancer is caused by varying mechanisms.Our preliminary study indicated that the expression of lncRNA SNHG7 was increased in drug-resistant breast caner,which could down-regulate the sensitivity of breast cancer cells to anthracycline or taxane by competitive binding to miR-34a or modulating breast cancer stem cells ability.Therefore,we propose a hypothesis that SNHG7 regulated the chemoresistance of breast cancer. However,the molecular mechanism is not clear.. To further clarify the mechanism that SNHG7 regulate the chemoresistance of breast cancer,reveal the potential values of SNHG7 in the treatment of breast cancer and reversal of chemotherapy resistance,and analyze the correlation between SNHG7 expression and the efficacy or prognosis of breast cancer patients with neoadjuvant chemotherapy,we will conduct the experiments in vitro and in vivo,such as gene overexpression and silencing techniques,RNA Pull down,RIP,ChiRP and et al.Our study is expected to elucidate the molecular mechanism of SNHG7 involved in the regulation of chemoresistance, and provide new molecular targets for individualized chemotherapy,reversing chemoresistance and prognosis evaluation of breast cancer.

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，化疗耐药是限制其治疗疗效的主要瓶颈。乳腺癌化疗耐药机制非常复杂，课题组前期实验发现“lncRNA SNHG7 在乳腺癌耐药细胞表达升高，可通过竞争性结合miR-34a或调控乳腺癌细胞的干性，来下调乳腺癌细胞对蒽环或紫杉类药物的敏感性”，因此我们推测SNHG7可调控乳腺癌化疗耐药，但具体的分子机制尚不清楚。.我们拟通过基因过表达及沉默技术、RNA pull down、RIP 和ChIRP等体内外实验进一步明确 SNHG7对乳腺癌化疗耐药的调控机制，揭示SNHG7在治疗乳腺癌及逆转化疗耐药性的潜在价值，并分析其表达与乳腺癌新辅助化疗疗效和预后的相关性。本研究有望阐明SNHG7参与调控乳腺癌化疗耐药的分子机制，为乳腺癌个体化化疗、逆转化疗耐药性及预后评估提供新的分子靶点。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，化疗是乳腺癌全身治疗最重要的治疗手段，而且化疗耐药是限制乳腺癌患者治疗疗效和预后的主要瓶颈。.乳腺癌化疗耐药机制非常复杂，长链非编码 RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)是近年来肿瘤发病、转移和耐药机制研究的新热点。SNHG7 (small nucleolar RNA host gene 7)，位于人类染色体9q34.3，与乳腺癌化疗耐药的关系及分子调控机制尚不清楚。本项目主要开展了三个方面的研究内容：（1）通过细胞实验和临床验证来初步证实“lncRNA SNHG7 与乳腺癌耐药的关系”。 SNHG7在构建的耐药细胞株表达升高，沉默耐药细胞株中SNHG7的表达，可以提高细胞的药物敏感性和药物相关的凋亡。新辅助化疗耐药的乳腺癌组织中表达升高，且SNHG7的表达升高往往提示低的PCR率和预后不良。（2）探讨SNHG7靶向miR-34a调控乳腺癌的化疗耐药和肿瘤细胞干性的分子机制。生物信息学分析和荧光素酶报告分析miR-34a是SNHG7的靶点，两者在耐药细胞或临床组织标本中的表达呈负相关，采用RNA干扰实验进一步证实了SNHG7与miR-34a相互作用对乳腺癌的化疗耐药和肿瘤细胞干性影响。（3）通过免疫荧光和WB 方法检测SNHG7干扰后乳腺癌耐药细胞株中LC3的变化，发现SNHG7可靶向自噬来参与乳腺癌化疗耐药的调控。（4）应用慢病毒载体构建MDA-MB-231/PTX原位移植瘤模型，观察鼠尾静脉注射紫杉醇后移植瘤体积变化，发现沉默 SNHG7的MDA-MB-231/PTX的移殖瘤较对照组在接受紫杉醇药物治疗后肿瘤增长缓慢或缩小。通过以上研究，我们探讨 SNHG7 与乳腺癌耐药的关系，发现lncRNA SNHG7可以通过靶向miR-34a调控乳腺癌的化疗耐药和肿瘤细胞干性，也可以影响乳腺癌细胞的自噬来参与化疗耐药的调控，丰富了SNHG7调控乳腺癌化疗耐药的分子机制，同时也通过动物移植瘤模型初步探讨了SNHG7在逆转乳腺癌化疗耐药中的生物靶点作用，为后续开发针对逆转乳腺癌耐药的靶向药物提供了一个新的思路。