miR-520b通过靶基因MICA调控血管损伤和动脉粥样硬化发展的作用和机制研究

Atherosclerosis is a serious threat to human health. In our previous study, the result suggested that MICA (MHC Class I Polypeptide-Related Sequence A) is involved in the progress of atherosclerosis. By the bioinformatics prediction and preliminary study, we raised the possibility that miR-520b modulate the progress of atherosclerosis by targeting MICA. We will firstly detect the RNA expression of miR-520b and MICA in case-control (case>500), and establish the ApoE-/- mouse model with high fat diet, and determine the RNA levels of miR-520b and MICA in atherosclerotic plaque, and then perform the correlation analysis to construct the prediction model of miR-520b and MICA for coronary heart disease; secondly, We will investigate the potential role of miR-520b in AS after delivery of miR-520b agomir/antagomir via tail vein-injected in ApoE-/- mouse; thirdly, we will detect whether miR-520b modulate the progress of AS through MICA by affecting endothelial cell apoptosis, the adhesion of monocytes to endothelial cells, vascular smooth muscle cell proliferation and migration, and subsequently explore the underlying mechanism. Our work will build the miR-520b/MICA regulation model and provide new evidence for the prevention and treatment in atherosclerotic cardiovascular disease.

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是严重威胁人类健康的重大疾病之一。前期研究结果提示组织相容性复合物I家族成员MICA基因可能参与AS的发生发展，申请人提出miR-520b负调控MICA进而抑制AS发展的科学假说。本研究首先在冠心病病例对照和高脂饮食饲喂ApoE-/-小鼠的AS模型中分析miR-520b和MICA在AS斑块中的表达水平，并分析相关性，构建miR-520b或者MICA对冠心病的预测模型；第二，在AS小鼠中通过尾静脉注射miR-520b的agomir或者antagomir，阐明miR-520b在AS病理过程中的作用；第三，采用过表达和沉默策略，探讨miR-520b通过MICA调控血管内皮细胞凋亡及其介导的黏附和平滑肌细胞增殖、迁移等的作用机制。本申请一旦实施将会构建miR-520b/MICA影响AS性心血管疾病发生发展的调控模型，为AS的防治提供新的线索。

动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）是世界范围内严重威胁人类健康的重大疾病之一。前期研究结果提示组织相容性复合物I家族成员MICA基因可能参与动脉粥样硬化的发生发展，结合生物信息学预测和预实验结果，申请人提出miR-520b通过抑制MICA和其他靶基因的表达进而调控内皮功能损伤和动脉粥样硬化发生发展的科学假说。前期研究表明，与人类正常血管组织相比，人源miR-520b的表达在动脉粥样硬化斑块中显著下调。然而，miR-520b在冠心病中是否发挥作用尚无任何报道。.本研究致力于阐明miR-520b在内皮功能障碍和动脉粥样硬化发生过程的作用机制。为了鉴定更多的miR-520b潜在靶基因，我们在内皮细胞中转染miR-520b的mimics，应用RNA-seq测序并进行qPCR验证。结果显示，过表达miR-520b显著下调促炎症反应因子的表达（例如：ICAM1, VCAM1, RELA, RELB），相反，敲低miR-520b显著上调这些基因的表达。结合生物信息学预测和功能学实验，本研究证明RELA（编码NF-κB转录因子P65蛋白，可以结合到MICA基因的启动子区并调控其表达）是miR-520b的直接靶基因。miR-520b显著降低胞浆和胞核组分中p65总蛋白的表达水平，且抑制VCAM1基因启动子活性。另外，miR-520b显著抑制单核细胞和内皮细胞的黏附及跨内皮迁移，而腺病毒介导的RELA基因过表达可明显逆转相关细胞表型。.本研究证明miR-520b可通过NF-κB p65-ICAM1/VCAM1/MICA调控轴介导内皮细胞炎症反应和单核-内皮细胞的相互作用，进而可能参与动脉粥样硬化早期的病理过程。本申请为动脉粥样硬化的防治提供新的理论依据和潜在的干预靶点。.本研究发表了1篇SCI论文，申请了1项专利。.