麝香酮对缝隙连接通道介导脑缺血ATP过度释放的调控研究

细胞内三磷酸腺苷（ATP）过度释放启动脑缺血下游级联反应，Connexin43（Cx43）蛋白组成的缝隙连接通道介导ATP的释放，Pannexin1（Px1）蛋白作用不明确。开窍药芳香走窜，前期研究证实麝香酮具有干预缺血后病理生理环节的神经保护作用。本课题在探讨Px 1通道与脑缺血ATP释放相关性的基础上，在细胞和整体动物水平观察缺血状态下麝香酮对神经元细胞内、外ATP含量变化及神经元损伤的影响；对Cx43通道和/或Px 1通道开放状况及开放时间的作用；对Cx43蛋白表达和/或Px 1蛋白糖基化水平的作用，从神经电生理学-神经病理学-分子生物学多层面，探讨麝香酮对缝隙连接通道介导ATP过度释放的调控机制，揭示其作用机理，该研究将为临床配伍开窍药提供理论依据，可丰富和发展中医"清窍闭阻"和"芳香开窍"的理论；有助于建立中医药调控ATP过度释放的研究平台，促进其他开窍药物的深入研究。

缝隙连接通道与缺血脑损伤关系密切，研究发现两个缝隙连接蛋白Connexin（Cx）组成的六聚体半通道两两对接形成的亲水性通道－缝隙连接通道（Gap junction）介导，Cx43亚型起主要作用。新的缝隙连接蛋白—Pannexin（Px）蛋白与脑缺血的关系不明确。我们的研究发现缺血的不同时间段Cx43和Px1均有不同程度表达增高。我们使用PX1拮抗剂拮抗Px1 表达后，缺血大鼠的梗塞面积缩小，同时发现缺血海马CA1区总体能量指标升高，提示Px1介导缺血后脑损害，有效拮抗Px1可以达到脑保护作用。我们发现中药单体麝香酮可以有效减轻脑梗塞损害和改善能量代放射。进一步发现麝香酮可以减少缺血后缝隙连接蛋白表达。提示其作用可能是通过干预缝隙连接通道达到神经保护作用。而一些慢性缺血病灶，我们发现低血红蛋白水平与之相关，提高血红蛋白水平可能有助于改善慢性缺血病变。我们胼胝体缺血病灶的研究中发现，右脑在视觉词形加工中起到一定的作用，如正字法加工；而左脑对提取视觉词形的抽象表征起着关键作用。