中药三维荧光指纹图谱分析方法的标准化问题研究

中药三维荧光指纹图谱是近几年应用于中药分析的一项新技术，在中药鉴别和质量评价中已经展现广阔的应用前景。然而，现有的中药三维荧光指纹图谱分析方法不适应国家药典委员会最近发布的关于中药指纹图谱的技术要求，因而不便推广应用，需要改进。本项目将以10种常用的中药材为例，从提取液的制备、荧光图谱的再现性、专属性、方法的耐用性、图谱的解析、参照物的选择、图谱的数据处理和计算分析等方面研究中药三维荧光指纹图谱分析方法的标准化问题，使之符合中药指纹图谱的技术要求。研究中将针对目前三维荧光图谱技术存在的缺陷，重点解决中药三维荧光指纹图谱的再现性问题，探索以溶剂水的拉曼散射作为荧光强度测量的参比，引入校正荧光强度和摩尔荧光系数等新概念，消除测量过程中仪器因素对荧光强度测量的影响。本项研究不仅将使中药三维荧光指纹图谱符合中国药典的要求，而且对于荧光分析法的发展也有重要的学术意义。

中药三维荧光指纹图谱在中药鉴别和质量评价中已展现广阔的应用前景。然而，现有的中药三维荧光指纹图谱分析方法不适应国家药典委员会发布的中药指纹图谱的技术要求，因而不便推广应用。本项目以10余种中药材为例，从样品溶液的制备、三维荧光图谱的再现性、专属性、实验方法的耐用性、三维荧光图谱的解析、分析参照物的选择等方面研究了中药三维荧光指纹图谱分析方法的标准化问题。研究重点是以水的拉曼散射作为荧光强度测量的参比，消除测量过程中仪器因素对荧光强度的影响，获得重现性良好的校正三维荧光指纹图谱。研究中提出了校正荧光强度和摩尔荧光系数等新概念。通过优化实验条件（如改变pH值或溶剂，加入有序介质、金属离子或硼砂）的方法，探讨解决了中药三维荧光指纹图谱的专属性问题。绘制了470多种中药对照药材的三维荧光指纹图谱，作为实际样品检验时的参照图谱。研究表明，三维荧光指纹图谱可用于几乎所有中草药的鉴别，并可用于部分中药材的质量评价。