EZH2介导H3-K27甲基化调控卵巢癌耐药相关基因hMLH1启动子甲基化的机制

EZH2通过甲基化组蛋白H3上第27位赖氨酸残基（H3-K27）、沉默抑癌基因表达等方式促进癌细胞增殖、抑制其凋亡。申请者发现卵巢癌顺铂耐药株中EZH2的表达水平比敏感株明显增高，特异性沉默EZH2能恢复耐药细胞对顺铂的敏感性；研究还表明在卵巢癌耐药细胞中hMLH1基因启动子甲基化而失去活性，促进耐药的发生，去除H3-K27甲基化亦可上调hMLH1的表达，恢复耐药细胞对顺铂的敏感性，提示EZH2/H3-K27甲基化在顺铂耐药中发挥重要作用.本课题拟就EZH2/H3-K27调控hMLH1甲基化机制开展以下研究：（1）在细胞及动物水平研究EZH2通过H3-K27甲基化募集DNMT诱导hMLH1启动子甲基化机制及对顺铂耐药性的影响。（2）通过阐明EZH2/H3-K27调控hMLH1甲基化的机制，将明确组蛋白甲基化在卵巢癌耐药中的具体调控方式，从而有助于阐明卵巢癌耐药表观遗传学调控机制。

EZH2通过甲基化组蛋白H3上第27位赖氨酸残基（H3-K27）、沉默抑癌基因表达等方式促进癌细胞增殖、抑制其凋亡。本课题的重点是研究EZH2/H3K27在卵巢癌增殖、侵袭和耐药中的具体调控方式，从而有助于阐明卵巢癌耐药的表观遗传学调控机制。我们发现了EZH2在卵巢癌恶性肿瘤组织和卵巢癌细胞株中高表达，并且EZH2的表达水平与组织学类型、细胞分化程度以及FOGO分期密切相关；EZH2在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达明显高于敏感株。本课题成功建立稳定沉默表达的卵巢癌细胞株，发现特异性沉默EZH2能够显著抑制卵巢癌细胞增殖迁移能力，抑制细胞裸鼠移植瘤的生长；还能有效逆转A2780/DDP细胞对顺铂的耐药性；并且可以导致未甲基化的hMLH1表达增加，但对甲基化的hMLH1表达没有明显影响， EZH2对hMLH1启动子区DNA甲基化状态没有调控作用。本课题首次阐明了EZH2通过介导H3K27甲基化调控hMLH1表达影响卵巢癌耐药的机制，提出EZH2可能成为卵巢癌耐药的表观遗传学治疗的新靶点。