乙酰化调节DDAH/ADMA系统的机制及其在盐致高血压中的意义

ADMA是内源性NOS抑制剂，在体内由DDAH降解，DDAH/ADMA系统异常可通过NOS及NO引发多种心血管疾病。本项目拟在我们证明了乙酰化参与nNOS基因表达调控的基础上，进一步探讨乙酰化对DDAH/ADMA系统的调节机制，及其在钠盐引发高血压中的意义。本研究首先以ROS为氧化应激指标鉴定NaCl引发的氧化应激反应，并检测其对DDAH基因表达和ADMA水平的影响；然后鉴定NaCl对乙酰转移酶p300表达和活性的影响及p300对组蛋白和NF-κB乙酰化的调节在DDAH基因表达调控中的作用，从而证明p300-NF-κB/组蛋白途径是NaCl影响DDAH表达的一种机制；最后通过高盐饲养SD大鼠，进行体内鉴定并证明其对血压水平的影响，从而阐明一种影响NOS和DDAH/ADMA系统两方面的共同途径，及盐通过该途径对血压水平的影响，这将为探索高血压发生的新的分子机制提供重要的理论依据。

一氧化氮（NO）由三种一氧化氮合酶（NOS）催化合成，非对称性二甲基精氨酸（ADMA）是三种NOS的共同内源性抑制剂，在体内ADMA主要由二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）降解，因此DDAH/ADMA系统和NOS是影响体内NO水平的两个重要方面。本研究鉴定了乙酰化调节DDAH2基因表达，从而影响NO合成的机制：一方面，我们鉴定了DDAH2启动子区的一个NF-κB反应元件，并证明NF-κB乙酰化可通过增强其与DDAH2启动子的结合，增加转录活性而上调DDAH2基因表达及NO合成；另一方面，DDAH2启动子区的H4组蛋白乙酰化亦可增强NF-κB与DNA的结合，从而上调DDAH2表达。同时我们还发现DDAH2自身可进行乙酰化修饰，从而影响其活性。我们进一步完善了NF-κB乙酰化调节神经型一氧化氮合酶（nNOS）基因表达的机制研究，证明了p300可作为乙酰转移酶和转录辅激活因子调节NF-κB的作用，从而调节nNOS基因表达。通过动物实验我们证明盐可引发氧化应激反应，而氧化应激反应可显著影响机体多种组织的总体乙酰化水平和组蛋白乙酰化水平。我们的研究结果证明了乙酰化调节DDAH/ADMA系统的一种机制，从而阐明了一种同时影响DDAH/ADMA和NOS两方面而对机体NO水平具有重要作用的途径，提示了盐引发的氧化应激反应可能通过影响乙酰化水平而影响DDAH/ADMA和NOS系统，从而影响机体NO水平和血压水平。参与调节DDAH2基因表达，其