血小板凝胶蛋白Gelsolin在冠心病血瘀证形成中的作用及赤芍总苷调控机制研究

梗死后心肌组织释放大量F-actin对内皮细胞和微血管产生毒害，血浆凝溶胶蛋白Gelsolin可切割F-actin解聚成G-actin，并通过肝脏内皮网状系统清除体外而阻止这种细胞毒。前期课题组差异蛋白组学研究发现血小板Gelsolin与冠心病血瘀证明显相关，血小板无转录本信息，故推测血小板Gelsolin含量升高是由于血浆Gelsolin消耗而引起血小板骨架蛋白反应性重组，这种病理性升高进一步加速血小板活化、变形而参与冠心病血瘀证形成。本研究拟通过冠心病贫、富血小板血浆Gelsolin含量与血小板活化相关性对这一假说进行验证，并借助F-actin诱导血小板活化体外和apoE基因敲除小鼠体内血小板活化实验体系，研究Gelsolin参与血瘀证形成过程及芎芍胶囊对血小板Gelsolin重组的调控及对血小板聚集、活化的影响。该研究将为活血化瘀中药抗血小板活化提供一定实验依据。

梗死后心肌组织释放大量肌动蛋白微丝（F-actin）对内皮细胞和微血管产生毒害，血浆Gelsolin可切割F-actin解聚成肌动蛋白单体（G-actin），并通过肝脏内皮网状系统清除体外而阻止这种细胞毒。前期课题组差异蛋白组学研究发现血小板Gelsolin与冠心病血瘀证明显相关，血小板无转录本信息，故我们推测血小板Gelsolin含量升高是由于血浆Gelsolin消耗而引起血小板骨架蛋白反应性重组，这种病理性升高进一步加速血小板活化、变形而参与冠心病血瘀证形成。.本研究通过冠心病血瘀证贫、富血小板血浆Gelsolin 含量与血小板活化相关性对这一假说进行验证，并借助F-actin诱导血小板活化体外和急性心肌梗死大鼠体内血小板活化实验体系，研究Gelsolin参与血瘀证形成过程及赤芍川芎有效组分配伍对血小板Gelsolin重组的调控及对血小板聚集、活化的影响。.本课题临床研究发现，血小板Gelsolin水平与冠心病血瘀证血小板活化水平高度相关，在冠心病血瘀证血小板活化过程中，细胞骨架蛋白含量也出现了不同程度的变化，集中体现在血小板Gelsolin和其靶蛋白F-actin的异常变化上，推测血浆Gelsolin含量降低与其因切割、清除F-actin而大量消耗有关，这种消耗引起血小板上的Gelsolin病理性重组，同时引起血小板钙离子内流增加，导致血小板变形能力增强而参与冠心病血瘀证的形成，因此血小板Gelsolin可能是冠心病血瘀证的特异性分子靶标之一。体外实验发现，F-actin体外能够激活血小板导致其聚集、活化，且高浓度能够刺激血小板大量分泌Gelsolin，其效应与AA相似。赤芍、川芎有效组分芍药苷、川芎嗪体外联合应用对聚集、活化后的血小板具有明显抑制作用，同时能够明显降低活化后血小板Gelsolin的含量。体内实验表明，赤芍川芎有效组分能明显降低血小板Gelsolin水平，增强血浆肌动蛋白清除系统活性，抑制血小板活化，同时具有一定的钙拮抗效应，且在抑制COX-1活性、降低TXB2水平方面与阿司匹林相似。同时，经相关性分析发现，赤芍川芎有效组分抑制血小板活化程度与降低血小板Gelsolin含量有关。