艾灸对高脂-动脉内皮损伤炎性反应的TRPV1调控机制研究

Moxibustion is a common method of clinical medicine treatment and disease prevention, but the research to explore the role of moxibustion effect based on the stimulate characteristics is not deep enough. Hyperlipidemia and arterial endothelial injury is easy to induce atherosclerosis pathology. In addition, the role of inflammation in cardiovascular disease more and more be taken seriously. Recent studies indicate that multiple temperature sensors of endocrine function are distributed on skin, where in the TRPV1 of TRP family, can be activated by thermal stimulus(>43℃), is an important regulatory molecule of the cardiovascular system. The influence of moxibustion thermal stimulation at different temperatures(38℃、45℃) on blood lipid and inflammation on high in lipid-artery endothelial injury mouse model will be first determined in this project. The effect difference of regulating blood lipid and the inflammatory response by moxibustion thermal stimulation at different temperatures will be sure. Then moxibustion activated TRPV1 effects on vascular endothelial cell morphology and function will be observed. In order to research the connection between the TRPV1 and regulate the inflammatory response. On this basis, observing the influence of moxibustion activated TRPV1 to TLR-NF-kB signaling pathways on high in lipid-artery endothelial injury inflammatory reaction. Then the relationship between moxibustion activated TRPV1 to control inflammation of to lead to mast cells degranulation and neuropeptide secretion will be further discussed.

艾灸是中医临床治疗与防病保健的常用方法，但基于艾灸的刺激特点探讨艾灸作用效应的研究还不够深入。高脂血症与动脉内皮损伤是易诱发动脉粥样硬化的病理状态，炎症反应在心血管病变中的作用越来越受到重视。新近的研究表明，皮肤上分布多种神经内分泌功能的温度感受器，其中TRP家族中的TRPV1，可被热刺激（>43℃）激活，是心血管系统中重要的调节分子之一。本项目首先确定38℃、45℃这2种温度的艾灸热刺激对高脂-动脉内皮损伤模型小鼠血脂及相关炎性介质的影响，以明确艾灸温度的不同所造成的调节血脂、调控炎症反应的效应差异；其次观察艾灸激活TRPV1对血管内皮细胞形态与功能的影响，研究TRPV1与调控炎症反应之间的联系；在此基础上，研究艾灸激活TRPV1对高脂-动脉内皮损伤炎性反应TLR-NF-kB信号通路的影响，并进一步探讨艾灸激活TRPV1调控炎症反应与激活TRPV1引发肥大细胞脱颗粒、神经肽分泌的关系。

本项目首先确定38℃、45℃这2种温度的艾灸热刺激对高脂-动脉内皮损伤模型小鼠血脂及相关炎性介质的影响，以明确艾灸温度的不同所造成的调节血脂、调控炎症反应的效应差异；其次观察艾灸激活TRPV1对血管内皮细胞形态与功能的影响，研究TRPV1与调控炎症反应之间的联系；在此基础上，研究艾灸激活TRPV1对高脂-动脉内皮损伤炎性反应TLR-NF-kB信号通路的影响，并进一步探讨艾灸激活TRPV1调控炎症反应与激活TRPV1引发肥大细胞脱颗粒、神经肽分泌的关系。. 本项目的研究过程和结果如下：1、采用生化方法检测，比较不同温度的艾条灸热刺激对高脂血症小鼠血脂的影响，发现不同温度的艾条灸热刺激对血脂及炎性反应均有改善作用，45℃艾条灸热刺激作用更优。2、通过组织形态学方法观察，比较不同温度的艾条灸热刺激对野生型正常小鼠与TRPV1-/-小鼠神阙穴施灸局部皮肤形态和功能的影响，利用HE染色法，发现不同温度的艾条灸热刺激不同程度的改变了小鼠神阙穴局部皮肤的形态结构，45℃艾条灸热刺激对小鼠施灸局部神阙穴皮肤组织形态结构的改变最大；利用甲苯胺蓝染色法，发现不同温度的艾条灸热刺激及药物刺激不同程度的改变了小鼠神阙穴局部肥大细胞数目和形态，与其它各组干预比较，45℃艾条灸热刺激使小鼠施灸局部神阙穴肥大细胞数目大量增多，并发生明显的肥大细胞脱颗粒现象。3、利用RT-PCR法检测，比较不同温度的艾条灸热刺激对背根神经节TRPV1的表达差异，利用western-blot法检测，比较不同温度的艾条灸热刺激对TLR2、TLR4、NF-kB的影响。. 基于本项目的研究，我们认为艾灸的热刺激可以激活TRPV1，通过TLR-NF-kB通路来达到调脂控炎的作用。.