LncRNA ANCR介导Hedgehog信号通路影响皮肤基底细胞癌发生的机制研究

Cutaneous basal Cell Carcinoma (BCC) is the most commonly occurring cutaneous cancer in the world and overall incidence is still on the rise; however, the exact molecular mechanism of its pathogenesis is still unclear. By bioinformatics analysis, we identified the close relationship among lncRNA ANCR, clinicopathological characteristics and prognosis of BCC. At the same time, the target gene protein ptch1 of lncRNA ANCR was found by RNA pull-down technique. Accordingly, we speculated that lncRNA ANCR regulates the occurrence and development process of BCC cells through Hedgehog signaling pathway. This study intends to revolve around the important scientific problems, and focuses on investigating the effect of proliferation and invasion in BCC after lncRNA ANCR expression changed using cell culture, protein biochemistry, gene silencing, tumor formation in nude mice, etc. This study would reveal the mechanism of cutaneous BCC caused by lncRNA ANCR-intermediated Hedgehog Pathway, and provide clue for gene therapy and treatment targeting for BCC.

皮肤基底细胞癌（BCC）是人类最常见的皮肤恶性肿瘤，其发病率正不断上升，但其发病的确切分子机理仍不清楚。课题组前期通过生物信息学分析，遴选到lncRNA ANCR与BCC临床病理特征及预后的关系密切。同时，通过RNA pull-down技术寻找到lncRNA ANCR的靶基因蛋白ptch1，据此我们推测：lncRNA ANCR可能通过Hedgehog信号通路调控BCC细胞的发生和发展过程。本研究拟围绕这个重要的科学问题展开，采用细胞培养、蛋白生化、基因沉默、裸鼠成瘤等技术，重点研究在调控lncRNA ANCR表达改变后对基底细胞癌增殖和侵袭等影响，以揭示lncRNA ANCR调控Hedgehog信号通路对基底细胞癌的发生和发展的作用机制，为临床靶向治疗BCC提供新思路及潜在靶点。

皮肤基底细胞癌（BCC）是人类最常见的皮肤恶性肿瘤。在全球范围，近十年来其发病率正以每年4-8%的速度持续上升。BBC生长速度相对缓慢，但具有极强局部侵袭能力从而破坏邻近组织，也可发生转移，其转移率约为5%。目前，外科手术仍是BCC的主要治疗手段，而非手术治疗方法，包括光动力、放疗、局部化疗、免疫调节剂治疗等，均存在一定的局限性和复发率。由于BCC的高发病率，给患者和社会造成沉重医疗负担。.课题组前期依据GSEA、GCBI数据分析和RNA pull-down技术作出推测：lncRNA ANCR可能通过Hedgehog（Hh）信号通路调控BCC细胞的发生和发展过程。本研究围绕这个重要的科学问题展开，采用细胞培养、蛋白生化、基因沉默、裸鼠成瘤等技术，重点研究在调控lncRNA ANCR表达改变后对基底细胞癌增殖和侵袭等影响，以揭示lncRNA ANCR调控Hh信号通路对BCC的发生和发展的作用机制。.通过实验验证，我们发现：在体外实验中，RT-qPCR与Western blotting检测lncRNA ANCR和Hh通路相关分子在BCC细胞和组织中均为高表达，进一步对lncRNA ANCR过表达后，BCC细胞增殖、迁移和侵袭能力增强，凋亡被抑制，且Hh信号通路分子PTCH、GLI1和SMO表达上调。对其敲低后，上述结果则相反。在体内实验时，将小鼠随机分为对照组、ANCR过表达组和oeANCR +环巴胺组3组，将lncRNA ANCR过表达的BCC细胞对小鼠进行皮下注射，与对照组相比较后发现可以促进BCC肿瘤生长并抑制细胞凋亡，Hh信号通路分子PTCH、GLI1和SMO的蛋白表达量亦上调，E-cadherin和Cleaved-caspase3表达下降。当对小鼠腹腔注射特异性Hh信号通路抑制剂环巴胺后，上述趋势均发生逆转。因此，我们认为：lncRNA ANCR/PTCH/Hh反馈环路可以调控BCC的发生和发展过程；过表达lncRNA ANCR可增加PTCH的表达，从而促进BCC的增殖、迁移和侵袭，并抑制凋亡。.本项目通过体内外实验等系列研究，进一步揭示BCC发生、发展中的分子事件，为进一步阐明BCC发生的分子机制提供了新的实验数据，亦为BCC的精准诊疗提供了新的策略。