肾上腺髓质素在人骨肉瘤中的表达及在肿瘤微环境中治疗作用研究

骨肉瘤的治疗是骨外科领域的研究难点，目前的治疗手段对骨肉瘤的治疗效果均不理想，急需探索新的治疗靶点。本课题组前期研究发现:肾上腺髓质素（ADM）在人骨肉瘤组织中呈高表达，且ADM的表达与缺氧诱导因子的表达呈正相关，我们推测ADM的过表达能促进骨肉瘤滋养血管的增生，最终促进骨肉瘤增殖并导致其远处转移。本课题拟在此基础上，应用已在肿瘤基因治疗中呈现良好发展趋势的RNAi技术，采用VEGF基因的厌氧反应元件HRE与Survivin的肿瘤特异性启动子联合构建骨肉瘤ADM-RNAi的特异性表达载体，利用腺相关病毒作为治疗性载体，通过多种细胞共培养体系建立骨肉瘤微环境，更真实的模拟肿瘤生长，以此方法建立荷瘤裸鼠模型，研究干扰ADM表达对骨肉瘤的治疗作用。研究意义：明确ADM在骨肉瘤中的过表达是导致骨肉瘤血管增生、细胞增殖的重要原因，探索新的骨肉瘤基因shRNA表达载体，为骨肉瘤靶向治疗提供新的思路。

ADM在人骨肉瘤组织呈阳性表达，主要定位于瘤细胞的外膜和细胞质中。ADM表达水平的高低与骨肉瘤的恶性程度和临床预后密切相关，呈示出明显的移行带。ADM的表达在缺氧诱导下进一步被激活，随着缺氧诱导时间的延长，ADM的表达逐步加强，VEGF的表达呈现类似的变化趋势，ADM通过上调VEGF的表达参与肿瘤新生血管的生成。成功构建慢病毒介导的肾上腺髓质素RNA干扰体系，ADM-shRNA慢病毒载体能够高效的沉默ADM基因的表达，并导致MG-63细胞部分程度的凋亡。成功构建骨肉瘤裸鼠模型，经慢病毒载体注射后，ADM基因的表达下调，裸鼠瘤体的增殖受到抑制。整个课题完成期间共发表SCI论文3篇，Medline1篇，协助培养博士生2名，硕士生2名。