Ar细胞在SAH状况下的活化和作用研究

Under the subsidizing of the national natural science funds,our research revealed that Ar (arachnoid) cells have the potential to serve as APC to activate T-lymphocytes and are involved in the process of initiating inflammation by blood coagulation after SAH (subarachnoid hemorrhage).But the functions of Ar cells during SAH are unknown in detail. This study will engage in three aspects of research on the cells, tissues and experimental animals. The functions of Ar cell activating, and cellular signaling pathways, the influence of a variety of inhibitors and DCI related cellular factors after SAH well be expiored. How the activated Ar cells activate the vascular adventitial fibroblasts and T cells as well as the influence on tissue slices and subarachnoid space injected. Then we can comprehensive and thorough understande about the function of Ar cells after SAH. we will inject cultured Ar cells(inactivating state) into subarachnoid space in order to treat and prevent the SAH and complications so as to provide a clue and basis for the novel and effective treatment or prevention methods.

我们在国家自然科学基金资助下研究发现，Ar（蛛网膜）细胞能够发挥抗原提呈细胞功能，激活T细胞，参与了SAH（蛛网膜下腔出血）后凝血启动炎症的过程。但有关SAH状况下Ar细胞的详细作用及其机制还远未了解。本项目将在细胞、组织片和实验动物三个不同层次上，进行三方面的研究：SAH状况下Ar细胞活化和细胞信号传导通路、以及多种抑制剂与DCI相关重要细胞因子对Ar细胞的作用；活化的Ar细胞对（血管外膜）成纤维细胞和T细胞的激活作用、以及对离体组织片的影响；采用培养Ar细胞注入SAH蛛网膜下腔方法，初步了解其治疗SAH及其并发症的作用。以期全面、深入地了解Ar细胞在SAH发生后的作用及机制，为发展新的有临床应用前景的治疗和预防手段提供思路和依据。

本研究发现：Ar（蛛网膜）细胞能够表达Cytokeratin 18和vimentin，说明其具有发挥多种功能和多方向分化的潜能；巨噬细胞发育和致敏剂GM-CSF、M-CSF对Ar细胞增殖均有促进作用，其中GM-CSF刺激Ar细胞后，细胞上清中的IL-6含量增高。用流式细胞仪检测到了SAH患者脑脊液细胞ck8+18和vimentin阳性的细胞；ELISA发现：SAH组的IL-23、IL-10和CD163的水平显著性升高（SAH组的平均秩次大于对照组）；IL-10随着出血天数的增加而升高，在14天达到高峰；TGF-β1在脑脊液中的含量在出血后早期明显高于晚期；CD163含量显著增多（可达到对照组的10-20倍），在出血后4-7天，SAH患者脑脊液中CD163的水平达到高峰。提示，GM-CSF有诱导Ar细胞M1化的作用；SAH后蛛网膜下腔内的Ar细胞可以发生M1和M2化；利用GM-CSF和M-CSF调节Ar细胞在SAH不同的阶段的极化状态，可能是促进机体修复的手段。.PKH26标记的单核细胞注入正常家兔蛛网膜下腔后，单核细胞随着脑脊液循环迁移并附着于蛛网膜和软脑膜；18F-FDG体外标记单核细胞异体植入兔蛛网膜下腔，植入的细胞迅速沿蛛网膜下腔广泛分布且持久清楚，在植入细胞3h时，仍可看到这些细胞可分布在从动物嗅脑到脊髓胸腰椎蛛网膜下腔的广泛区域，获得了理想的蛛网膜下腔示踪结果。且异体细胞植入后对兔子并无明显影响，动物体温、饮食及精神状态均良好，全部实验动物长期存活。为蛛网膜下腔细胞植入的应用提供了依据。植入细胞迅速沿蛛网膜下腔广泛分布的特点，应该在制定细胞移植策略和疗效预测时给予充分考虑。.本研究深化了Ar细胞在SAH发生后的作用及机制，为发展新的有临床应用前景的治疗和预防手段提供思路和依据。