基于斑马鱼模式生物的民间药冷饭藤中活性和毒性成分的研究

五味子科植物是目前天然产物化学研究的热点之一，近几年从该科南五味子属植物中分离得到了很多结构新颖，且活性较好的化合物。冷饭藤为该科南五味子属植物中研究较少的一个物种，其藤茎和根为常用的民间药，该植物与本属的其他几个物种亲缘关系较近，且传统功效相似，这预示着该植物也具有较好的研究价值。斑马鱼有独立的组织器官，且其器官与人器官在结构、生理、分子水平等方面十分相似，是一种很好的可以模拟人体内的绝佳模式生物，已被应用于大规模的药物筛选和毒理学研究。该模型药物需要量少，施药方式简单，药物易于被吸收，筛选过程可实现自动化，因此，更适宜被用于天然产物的药效筛选和毒性评价。本项目应用斑马鱼模式生物，研究冷饭藤的化学成分对其血管生成、心脏功能和胚胎发育的影响，同时进行不同肿瘤细胞系的抗肿瘤活性的研究，并对活性较好且毒性较低的化合物在冷饭藤中的分布进行分析，为五味子科植物资源的开发与利用提供理论基础。

冷饭藤Kadsura oblongiflolia Merr.为五味子科南五味子属植物，又称吹风散、入地射香、水灯盏、细风藤、饭团藤，主要分布于中国海南、广东、广西等省区，具有祛风除湿，行气止痛的功效，其藤茎和根在民间常用于治疗感冒、风湿痹痛、跌打损伤、心胃气痛及痛经等。为更合理地开发和利用冷饭藤的药用价值，进一步明确冷饭藤的物质基础，本项目对冷饭藤进行了化学成分的研究，并对部分化合物进行了毒性评价和体外抗肿瘤活性的研究。应用70%丙酮提取冷饭藤藤茎，采用硅胶、MCI HP20凝胶、Sephadex LH-20凝胶等柱色谱技术进行分离纯化，得到49个化合物，根据理化性质及波谱数据鉴定了其中44个化合物的结构，包括：木脂素类化合物32个（联苯环辛烯类木脂素20个，螺苯骈联苯环辛烯类木脂素9个，二芳基丁烷类木脂素3个），黄酮类化合物9个，降三萜类化合物1个，甾体1个，三萜类化合物1个。其中，新化合物2个，从本植物中首次分离的化合物14个。应用斑马鱼模型，观察部分化合物对其胚胎发育、心脏功能和血管生成的影响，发现化合物28、38和39使斑马鱼的心率明显下降，对斑马鱼的心脏发育有干扰作用，化合物39和43明显抑制节间血流数量，具有抑制血管生成的作用。应用MTT法对部分化合物进行体外肿瘤细胞系（A549、HELA、HCT-8和HepG-2）的抗肿瘤活性筛选，显示了较弱的细胞毒活性。通过本项目的研究，阐明了冷饭藤的主要化学成分，为开展进一步的药理学研究提供了物质基础，同时为应用斑马鱼模型进行天然产物毒性评价的适用性提供参考。