hepaCAM粘附分子丢失诱导膀胱癌的侵袭转移机制

侵袭转移为恶性肿瘤最显著的生物学特征和肿瘤患者临床致死的主要原因，也是人类面临亟待阐明和解决的重大基础研究课题。本课题以膀胱癌为研究对象，新粘附分子-hepaCAM为切入点，从相关基因、功能蛋白及活化因子多层面，采用现代医学分子生物学技术，通过体外及动物实验，首次探索hepaCAM对膀胱癌侵袭转移的下游相关效应分子Ecadherin、MMP2、MMP9、IL-8、VEGFR2及NF-kB的调控，探讨hepaCAM与膀胱癌侵袭转移的关键靶点，在此基础上，进而从肿瘤表观遗传学角度，探讨hepaCAM的上述调控作用是否与hepaCAM基因甲基化有关，从而阐明hepaCAM阻遏膀胱癌等恶性肿瘤侵袭转移的新途径及分子机制，丰富了对恶性肿瘤病理机制的认识，对于设计有效的抗侵袭转移策略至关重要，为恶性肿瘤的防治及早期诊断提供新靶点和新策略，具有科学探索性和临床应用前景。

增殖为恶性肿瘤最显著的生物学特征和肿瘤患者临床致死的主要原因，也是人类面临亟待阐明和解决的重大基础研究课题。本课题以膀胱癌为研究对象，新粘附分子-hepaCAM为切入点，从相关基因、功能蛋白及活化因子多层面，采用现代医学分子生物学技术，通过体外及动物实验，首次探讨hepaCAM对膀胱癌增殖能力的影响：hepaCAM(mRNA)在膀胱癌组织中表达低于癌旁组织同时在细胞株BIU-87和T24中低表达，这是课题组研究hepaCAM的前期基础。随后构建了hepaCAM基因重组腺病毒质粒并对其功能进行鉴定；同时进行了hepaCAM对膀胱移行癌细胞基因表达谱的分析，这为课题组后期通路研究埋下伏笔。hepaCAM在膀胱癌组织中表达低于癌旁组织, p-mTOR在癌组织表达高于癌旁组织（P<0.01）, 过表达hepaCAM（腺病毒感染）后，抑制膀胱癌三种细胞株(T24/BIU-78/EJ)增殖能力以及下调AMPK/mTOR信号通路相关分子； IFN-r使BIU-87阻滞的GO/G1期(P<0.01),上调hepaCAM基因和p21WAF的表达（P<0.05）而抑制膀胱癌细胞的增殖；hepaCAM在膀胱癌组织中表达低于癌旁组织,β-catenin在癌组织表达高于癌旁组织（P<0.05）, 过表达hepaCAM（腺病毒感染）后，抑制膀胱癌细胞株(T24)增殖能力以及下调Wnt/β-catenin信号通路相关分子。进而从肿瘤表观遗传学角度，探讨hepaCAM的调控作用抑制肿瘤细胞增殖与hepaCAM基因甲基化有关：hepaCAM甲基化在膀胱癌组织高于癌旁组织（P<0.05）, 去甲基化药物5-Aza-2′-deoxycytidine和 5-Azacytidine作用膀胱癌细胞株后hepaCAM去甲基化，表达上调（P<0.01）,阻滞细胞于G0/G1期，抑制细胞增殖；裸鼠成瘤后，药物5-Azacytidine处理组肿瘤体积明显小于对照组（P<0.01）,免疫组化显示药物处理组甲基转移酶DNMT的表达低于对照组（P<0.01）。.本课题实验结果阐明了hepaCAM阻遏膀胱癌等恶性肿瘤增殖的新途径及分子机制，丰富了对恶性肿瘤病理机制的认识，对于设计有效的抗增殖策略至关重要，为恶性肿瘤的防治及早期诊断提供新靶点和新策略，具有科学探索性和临床应用前景。