建立小鼠正常妊娠模型CBA×BALB/c和自然流产模型CBA×DBA/2。以寿胎丸为被试因素。用二维凝胶电泳分离子宫蜕膜组织蛋白质,图像分析确立差异蛋白质量,然后用基质辅助激光解吸离子飞行质谱(MALDI-TOF)进行蛋白质性质鉴定,针对子宫蜕膜组织的差异表达蛋白质,以原位杂交组织化学技术和蛋白印记(Western blet)进行验证。从子宫蜕膜组织中寻找与自然流产相关的差异表达蛋白质,并探讨寿胎丸可能的作用环节。为中药防治反复自然流产提供新思路和理论依据。
背景:反复自然流产(RSA)是一种常见的病理性妊娠,发生率高。严重危害了妇女的生殖健康。本课题在分子水平上探讨寿胎丸治疗RSA机制,提高中药防治RSA的水平,对人类生殖、生殖健康均具有重要的现实意义。.方向:从子宫蜕膜组织中寻找与自然流产相关的差异表达蛋白质,并探讨寿胎丸可能的作用环节。为中药防治反复自然流产提供新思路和理论依据。.完成情况:按任务书的要求,完成了RSA小鼠蜕膜组织,用二维凝胶电泳分离子宫蜕膜组织蛋白质,图像分析确立差异蛋白质量,然后用基质辅助激光解吸离子飞行质谱(MALDI-TOF)进行蛋白质性质鉴定,针对子宫蜕膜组织的差异表达蛋白质,以原位杂交组织化学技术和蛋白印记(Western blet)进行验证。.取得结果:证明寿胎丸能够降低复发性流产小鼠模型的胚胎丢失率,具有显著的安胎作用。成功建立了模型组、正常组、寿胎丸高、中、低剂量组的双向凝胶电泳(2-DE)图谱,鉴定了30个差异表达的蛋白质,提示复发性流产是一多种蛋白质参与的复杂过程,小鼠蜕膜组织的比较蛋白质组学分析是筛选复发性流产病变相关蛋白质的可靠方法之一;寿胎丸可调节复发性流产小鼠蜕膜组织多种蛋白质的表达,提示该复方具有多靶点的作用特点。HSP27、α-enolase、Transferrin、Annexin A2的蛋白印迹和免疫组化验证结果与蛋白质组学分析结果一致,从一定程度上证明了蛋白质组学实验方法的稳定性及其结果的准确性;寿胎丸通过下调复发性流产小鼠蜕膜组织HSP27、α-enolase蛋白的表达,同时上调Transferrin、Annexin A2蛋白的表达,从而实现维持妊娠,降低胚胎丢失率,这可能是其安胎的作用机制之一。.取得成果:公开发表论文6篇,待发表论文7篇。已培养博士1名,硕士2名。参加国内学术会议6人次。已获与该课题内容相关的国自然项目资助。
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数据更新时间:2023-05-31
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