CD34+细胞旁分泌IGF-1调节VEGF通路改善下肢缺血的机制

糖尿病性下肢缺血的治疗是临床中的难题之一，我们前期发现糖尿病性下肢缺血小鼠的血管内皮生长因子（VEGF）通路受损，采用CD34+细胞治疗明显促进血管生成，但发现直接分化的血管内皮数目少，因此其可能主要经细胞旁分泌起作用，预试验发现有旁分泌作用的胰岛素样生长因子（IGF-1）在细胞培养上清中增高。为此提出假说：在糖尿病性缺血状态下，移植CD34+细胞可旁分泌IGF-1调节VEGF通路进而促进血管生成。我们拟采用培养CD34+细胞上清和经60Co－γ射线照射的CD34+细胞（无增殖但有分泌能力）分组缺血部位注射，设对照，观察各组缺血恢复、IGF-1及VEGF和VEGFR、及下游因子Akt、FAK、PLCγ的表达。体外检测CD34+细胞分泌IGF-1及对血管内皮及VEGF通路的影响。以探索CD34+细胞分泌IGF-1与VEGF通路间关系，对阐明糖尿病时CD34+细胞的促血管生成机制有重要意义。

糖尿病性下肢缺血的治疗是临床中的难题之一。 我们前期发现糖尿病性下肢缺血小鼠的血管内皮生长因子（VEGF）通路受损，采用CD34+细胞治疗明显促进血管生成，但发现直接分化的血管内皮数目少。进一步的体外实验证实旁分泌作用的胰岛素样生长因子（IGF-1）在细胞培养上清中增高。我们用60Co-γ射线照射的CD34+细胞，使其失去增殖能力，但保留其旁分泌性，结果发现照射前后的细胞上清均能促进血管内皮细胞的增殖，并激活VEGF相关通路。在动物模型上，我们用内皮祖细胞及辐照失去增殖能力的内皮祖细胞分别对缺血肢进行注射细胞治疗，结果发现二者均能很好的缓解缺血肢的血流量，证明了内皮祖细胞在治疗下肢缺血过程中主要是通过旁分泌IGF、VEGF等细胞因子来活化内源内皮细胞，促进其增殖，形成新生血管，缓解下肢缺血症状。在临床，我们通过外周血干细胞动员、自体外周血干细胞移植治疗下肢缺血性疾病，并取得了很好的临床疗效。本研究作为理论基础，指导了内皮祖细胞在临床上的应用。