杂环缩氨基硫脲及其金属配合物的合成，晶体结构和生物活性

利用药物拼合原理和金属离子在抗癌、抗菌作用中的协同作用，以含杂环的醛或酮与不同组成的氨基硫脲、双氨基硫脲，N-4取代基（甲基，乙基，环己基，吡啶基、苯基等）硫脲，肼基二硫代甲酸甲酯、肼基二硫代甲酸苄酯等缩合的衍生物配体与不同化合价、不同阴离子、不同组成的金属离子进行配位反应；用元素分析、核磁、光谱以及X-ray 单晶分析技术对所合成的化合物进行结构的精确确定；用MTT法测定化合物对肿瘤细胞及正常细胞的IC50值，通过观察目标化合物对荷瘤鼠内肿瘤的抑制率和生命延长率评价体内活性，通过流式细胞光度术(FCM)分析细胞周期和凋亡细胞DNA特异性荧光染色检测以及药物作用前后DNA梯状条带检测分析抗肿瘤作用机制；采用孔注入法测定抗菌谱，采用涂平板和稀释肉汤法测定MIC值， 通过测定菌体的生长曲线和扫描电镜观察菌体形态结构，对抑菌机制进行初步研究；该项目的实施将为金属药物的开发提供实验数据和理论指导。

杂环缩氨基硫脲及其金属配合物由于其配位模式的多样性和显著的抗菌、抗肿瘤等多种生物活性，而受到世界各国的化学家和医药工作者的广泛关注。该类化合物的生物活性与配体的不同取代基、金属的种类和配位方式有关。因此，深入研究杂环缩氨基硫脲及其金属配合物的合成、表征与生物活性，对寻找新的高效、低毒的抗菌、抗癌药物有着重要的理论及实际意义。本项目利用药物拼合原理和金属离子在抗癌、抗菌作用中的协同作用，以含杂环的醛或酮与不同组成的氨基硫脲、双氨基硫脲、硫代缩二氨基脲、N-4取代基（甲基，乙基，环己基，吡啶基、苯基等）硫脲，肼基二硫代甲酸甲酯、肼基二硫代甲酸苄酯等缩合的衍生物配体与不同化合价、不同阴离子、不同组成的金属离子进行配位反应；用元素分析、核磁、红外光谱、紫外-可见光谱、质谱以及X-ray 单晶分析技术等多种分析手段对所合成的化合物进行结构表征和在溶液中存在形式的研究；用MTT法测定化合物对肿瘤细胞(白血病细胞K562、结肠癌细胞HCT-116, 宫颈癌细胞 Hela , 肝癌细胞HepG2）和正常肝细胞QSG7701的体外细胞毒性以评价其体外活性，通过测定目标化合物对荷瘤鼠内肿瘤的抑制率评价体内活性；采用孔注入法测定抗菌谱，采用涂平板和稀释肉汤法测定MIC值，评价其对革兰氏阳性细菌（金黄色葡萄球菌 藤黄八叠球菌, 枯草芽孢杆菌, 蜡样芽孢杆菌）和革兰氏阴性细菌（铜绿假单胞杆菌, 鼠伤寒沙门氏菌, 大肠杆菌, 根癌土壤杆菌）的抗菌活性；采用吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）双荧光染色结合荧光显微镜从形态学上观察 HepG2肝癌细胞的凋亡形态；采用罗丹明 R123 染料结合高内涵活细胞成像系统(HCS)检测细胞线粒体膜电位的变化；利用荧光探针 DCFH DA (二氯荧光素双乙酰乙酸盐 2’，7’ dichlorofluorescein diacetate)检测细胞内活性氧（ROS）的含量，采用 Annexin V/ FITC 凋亡检测试剂盒和 Caspase -3 激活检测试剂盒，结合荧光免疫检测法和高内涵活细胞成像系统(HCS)来评估其诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡程度，从细胞水平探讨化合物诱导肿瘤细胞凋亡的机制；该项目的实施将为金属药物的发展提供实验数据和理论指导。