桂滇黔交界地区壮族泌尿系结石人群钙敏感受体基因多态性分布及其与血钙水平相关性研究

The formation of urinary calculi is a multiple factors involved in the process of current on the pathogenesis of urinary calculi has not yet fully understood. The causes of urinary stone formation mainly involve individual factors and environmental factors. Previous Studies have shown that calcium sensitive receptor gene polymorphism and calcium stone has a close relationship. This research intends to collect the venous blood of the healthy people and the urinary calculi patients of Zhuang nationality who live in the Border area of Guangxi, Yunnan and Guizhou provinces. By mutation polymerase chain reaction and separation mismatch polymerase chain reaction - restriction enzyme fragment length analysis and direct sequencing method to detect the zhuang region urinary calculi crowd type calcium sensitive receptor gene polymorphism distribution, screening of zhuang people suffering from urinary tract stones in the region of susceptibility genes, analyze its correlation with blood calcium levels. From the Angle of calcium type sensitive receptor gene polymorphism, explore the molecular biology mechanism of urinary calculi incidence, in order to further elucidate the pathogenesis of urinary calculi and prevention provide a new train of thought.

泌尿系结石的形成是一个多因素参与的过程，目前关于泌尿系结石的发病机理尚未完全明了。泌尿系结石形成的病因主要涉及个体因素和环境因素两大方面。研究表明，钙敏感受体基因的多态性和含钙结石有密切的关系。本课题拟收集桂滇黔交接地区泌尿系结石人群和非泌尿系结石人群的静脉血。采用突变分离聚合酶链反应和错配聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度分析以及直接测序的方法检测出该地区壮族泌尿系结石人群钙敏感受体基因型多态性分布情况，筛选该地区壮族人群罹患泌尿系结石的易感基因，分析其与血钙水平的相关性。从钙敏感受体基因型多态性的角度探索泌尿系结石发病的分子生物学机制，为进一步阐明泌尿系结石的发病机制及防治提供新的思路。

本项目收集桂滇黔交界地区壮族泌尿系结石病人及健康人群血液样本各200份，采用突变分离PCR 和错配PCR-限制性片段长度多态性检测法对钙敏感受体（CaSR）的第986位、第990位和第1011位核酸进行基因多态性检测，并与患者的血钙水平交叉分析，寻找易感基因。研究发现在第986位核确认两种基因多态性，分别为G和GT；在第990位确认四种基因多态性，分别为A，AG，G和GA；在第1011位确认两种基因多态性，分别为C和GC。第986位等位基因，GT基因携带者的血钙水平，结石患者明显高于对照组。第986位基因携带GT等位基因者，血钙水平高于携带G者。第1011位基因携带GC者，其血钙水平高于携带C者。而第990位基因，其四种等位基因，各组间血钙无显著差异。综上所述，本研究提示第986位等位基因GT携带者，第1011位等位基因GC携带者，为结石的易感基因。在体检或临床检查中，若发现第986位等位基因GT携带者，以及1011位等位基因GC携带者，提示其更易发展为结石患者。建议告知其须更加注意与规避升高血钙的生活方式，远离易发展成泌尿系结石的工作环境，为泌尿系结石防治提供新的思路。本项目资助发表科技核心论文3篇，待发表2篇。培养硕士研究生2名。项目投入经费17万元，支出13.1275万元，各项支出基本与预算相符。剩余经费3.8725万元，剩余经费计划用于本项目研究后续支出。