针对性蛋白组学技术分析参与肝癌hTERT上调的转录因子

本研究针对严重危害国人健康的肝癌，在前期研究基础上，利用生物素标记的hTERT调控区基因片段，应用亲和沉淀技术，从端粒酶阳性肝癌及对应端粒酶阴性癌旁组织分别得到与hTERT调控区基因片结合的蛋白；采用双向电泳技术，对与hTERT调控区基因片结合蛋白进行比较分析，选取癌与癌旁差异蛋白进行质谱分析，目标是分离确定差异蛋白，克隆相应的差异蛋白。最后应用分子生物学及基因转染技术，构建携带这些差异蛋白的真核表达载体，并与携带hTERT调控区的荧光素酶的表达载体共同转染肝癌细胞，在细胞内对这些差异蛋白进行功能鉴定，观察对端粒酶hTERT的转录调控功能。本研究旨在分析鉴定参与肝癌细胞hTERT上调的转录因子，对认识肝癌的发病机理和寻找肝癌诊疗的新的靶点提供实验基础。