基于调控肠上皮细胞内质网应激-自噬探讨健脾清肠方干预溃疡性结肠炎的机制

Ulcerative colitis (UC) has seriously affected the health and quality of life of UC patients. Endoplasmic reticulum stress (ERS) of intestinal epithelial cells (IECs) induces autophagy to activate the PERK-eIF2α-ATF4 / BECN1-Atg7- LC3II pathway, which may be an important mechanism that damages the intestinal mucosal barrier and leads to the occurrence of UC. Previous studies have found that Jianpi Qingchang Decoction (JQD) could regulate the PERK-eIF2α/NF-κB signaling pathway for the treatment of UC and inhibit ICC over autophagy, regulate the ICC/SMC network pathway to regulate the dynamic abnormalities. We applys DSS induced colitis,IL-10 gene knockout mice, and Tg induced ERS induced autophagy in human IECs and HT29 cells as an object of study, uses cell biology and molecular biology research methods, to explore the function of ERS induced autophagy in IECs in the pathogenesis of UC development of UC, and to study on the probable mechanism of how JQD treats UC by regulating this pathway in order to enrich the scientific connotation of TCM therapy of UC.

溃疡性结肠炎（UC）严重影响患者的健康和生活质量。肠上皮细胞内质网应激诱导自噬激活PERK-eIF2α-ATF4 / BECN1-Atg7- LC3II通路，可能是损害肠道黏膜屏障，导致UC发生的重要机制。健脾清肠方（JQD）治疗UC疗效确切。前期研究发现：JQD通过调控PERK-eIF2α/NF-κB 信号通路治疗UC；抑制ICC过度自噬，调控ICC/SMC网络通路调节UC动力学异常。本项目以DSS诱导急性结肠炎小鼠模型、IL-10基因敲除慢性结肠炎小鼠模型和Tg诱导人结肠黏膜上皮细胞和HT29细胞内质网应激诱导自噬模型为研究对象，利用细胞和分子生物学等技术，研究PERK-eIF2α-ATF4 / BECN1-Atg7- LC3II通路在肠上皮细胞内质网应激诱导自噬在UC发病中的作用，探讨健脾清肠方可能是通过调节该通路而治疗UC的作用机制，丰富中医健脾清肠法治疗UC的科学内涵。

溃疡性结肠炎(UC)严重影响患者的健康和生活质量。健脾清肠方(JPQC)治疗UC疗效确切，但作用机制亟待进一步明确。肠上皮细胞(IECs)内质网应激诱导自噬激活PERK-eIF2α-ATF4 / Beclin1-Atg7-LC3II通路，可能是损害肠道黏膜屏障，导致UC发生的重要机制。本项目以DSS诱导急性结肠炎小鼠模型、IL-10基因敲除慢性结肠炎小鼠模型和Tg诱导HIECs、HT29细胞内质网应激诱导自噬模型为研究对象，利用细胞和分子生物学等技术，研究PERK-eIF2α-ATF4 / Beclin1-Atg7-LC3II通路在IECs内质网应激诱导自噬在UC发病中的作用，探讨健脾清肠方可能是通过调节该通路而治疗UC的作用机制。研究鉴定出JPQC中44个化合物，马齿苋（POL）中35个化合物。研究发现：JPQC及POL通过调节细胞因子水平，促进损伤的结肠黏膜修复，从而发挥干预急、慢性结肠炎小鼠模型的作用。JPQC和POL还能够通过调控ERS-自噬PERK-eIF2α-ATF4 / Beclin1-Atg7-LC3II信号通路减轻了内质网应激-自噬对IECs损害。此外，JPQC及其含药血清通过减轻内质网应激，调节PERK/eIF2α/ATF4/CHOP和NF-κB通路，修复小鼠肠黏膜屏障，防治UC。JPQC中的黄芪中的黄芪多糖(AP)能够抑制 Tg 诱导HT29细胞发生内质网应激，减弱内质网中蛋白质的积聚，降低内质网负荷和扩张程度，从而保护细胞免于损伤。研究阐明由脾虚夹湿热导致“久痢”和“内疡”的病理实质，丰富中医药治疗UC的科学内涵。