XMRV病毒在我国人群中的感染状况及其与疾病相关性

XMRV（Xenotropic Mu-MLV Related Virus，XMRV）是新发现的第一个能够感染人的γ型逆转录病毒。由于逆转录病毒具有插入宿主染色体引发基因突变的特性，以及部分γ型逆转录病毒携带原癌基因并能诱发癌症，致使XMRV感染与人类疾病之间的关系受到广泛关注。研究表明XMRV感染与前列腺癌和慢性疲劳综合症高度相关，但相关研究没得到更多的证实。我国目前尚未见XMRV感染及相关研究的报道。我们在前期工作中从我国健康献血员中检测到XMRV病毒（3/83）。本项目拟进一步筛查XMRV病毒在我国人群中的分布特点及其与疾病的相关性，研究XMRV是否经血液传播和急慢性感染的临床症状，利用反向遗传学构建XMRV感染性克隆，建立细胞模型和动物模型以研究XMRV可能的致病机理，建立XMRV感染的血清学诊断方法，评价这一新发现病原在我国公共卫生上的意义。

异嗜性鼠白血病相关病毒（XMRV）是新发现的人gamma型逆转录病毒，于2006年首次从人前列腺癌组织样本中鉴定出该病毒。接下来的研究表明，慢性疲劳综合征病人和健康献血员的血液中也检测到XMRV病毒。然而，来自不同的实验室或不同地区的研究却得出了相互矛盾的结果。因此，XMRV病毒与疾病的相关性及其在不同人群中的感染状况迫切需要得出明确的结论。在北美，一些研究人员在前列腺癌样本和慢性疲劳综合征病人血液中发现XMRV病毒，但是来自欧洲的一些研究却得出相反的结论，没有在上述样本中发现XMRV病毒感染。考虑到该病毒的重要性（如果该病毒的确存在，将是除HIV以外第二个能够感染人的Ɣ型逆转录病毒）以及我国人口基数庞大、人口分布广泛等特点，有必要研究我国健康人群、前列腺癌组织样本及免疫抑制人群中是否存在XMRV病毒感染。本项目共收集了391份健康献血员血液样本，20份前列腺癌组织切片样本和40份免疫抑制病人血液样本（这些病人都接受了肝脏移植手术并长期服用免疫抑制剂以对抗排异反应）。从上述样本中提取总RNA或基因组DNA, 利用巢式PCR、实时定量PCR扩增XMRV病毒gag基因或env基因，检测血液及前列腺癌组织样本中是否含有XMRV病毒序列。XMRV病毒最早发现于前列腺癌组织，后来研究发现前列腺细胞LNCaP能够有效地支持XMRV病毒复制，为进一步提高本研究检测灵敏度，我们将血清与前列腺癌细胞LNCaP进行孵育以提高其滴度，然后提取该细胞的总RNA来筛查XMRV病毒。. 研究结果表明，在我国健康献血员血液样本、前列腺癌组织样本和免疫抑制病人血液样本中均未检测到XMRV病毒序列。在研究过程中出现的阳性反应条带经测序和序列分析发现来自鼠源污染（与小鼠基因的同源性大于99%）。由于本研究所用巢式PCR引物及反应条件与第一篇报道XMRV发现的文献一致，因此，XMRV病毒是否真的存在有待商榷并值得进一步研究， 本项目的研究结论也被国内外很多相关研究所证实。本研究还建立了血液样本高通量测序技术方案以进一步筛查XMRV病毒或其他未知病原体，尽管高通量测序结果同样没有发现XMRV病毒，却发现一株新型TTV(Torque Teno Virus)病毒，该病毒与疾病的关系正在研究中，同时也说明高通量测序在血液安全保障和未知病原体鉴定中具有重要作用。本项目共培养研究生3名，发表论文8篇。