小肠移植后移植肠细菌定植与演替变化

移植感染为小肠移植研究领域的难点问题。本申请项目拟采用现代分子生物学技术如变性梯度凝胶电泳(DGGE)、实时定量PCR(Q-PCR)、荧光原位杂交(FISH)和16S rDNA克隆测序，定量分析和鉴定构成移植肠菌群结构特征，研究小肠移植后至移植肠功能恢复过程中，移植肠与原肠定植细菌的异同，研究这一新建立的肠道菌群微生态系统特征；通过比较分析移植后的移植肠与原肠中肠道菌群谱系变化和谱系相对丰度差异，发现移植后肠道菌群的演替变化规律，揭示小肠移植后移植肠的肠道菌群屏障功能改变特性。以全新的角度阐释小肠移植后肠源性感染发生的机制，为今后小肠移植后肠屏障功能保护，延缓或阻止肠源性感染的发生，建立研究基础。本项目拓展了肠屏障功能的研究，为肠屏障功能损伤与维护研究为提供新思路。

按照课题任务书的要求开展研究，已完成全部研究内容，达到了预期目标。增加了“鱼油对小肠移植肠菌群和肠黏膜屏障功能的影响”的研究，明确了鱼油促进移植肠功能损伤修复的分子基础。完成的研究内容包括三个方面：1）小肠移植大鼠肠道菌群变化及肠黏膜屏障功能损伤研究：通过建立原位小肠移植动物模型，应用PCR-DGGE分析和DNA测序，发现了小肠移植后肠腔菌群和肠黏膜（包括移植肠、自体回肠、结肠）菌群变化特征，揭示了小肠移植肠黏膜屏障功能损伤的机制。2）小肠移植病人肠道菌群演替变化研究：对2例小肠移植病人肠道菌群变化进行1年跟踪研究，明确了小肠移植术后肠道菌群演替变化特征，发现病人肠上皮屏障功能损伤。3）鱼油对小肠移植肠道菌群和肠黏膜屏障功能损伤影响：发现鱼油可促进小肠移植大鼠移植肠、自体肠（包括自体空肠、回肠和结肠）肠黏膜及粪便菌群向正常菌群组成模式变化，同时可促进肠上皮屏障损伤的修复。本研究明确了小肠移植后肠道细菌菌群演替变化特征，发现小肠移植肠道菌群失衡与肠黏膜屏障功能损伤同时存在，为小肠移植肠源性感染形成的基础；首次确定鱼油对移植肠菌群和肠黏膜屏障功能损伤修复作用，为临床发展小肠移植肠屏障损伤修复新方法提供了新的方向。课题实施期间，发表SCI文章7篇（均标注资助），培养博士研究生4名、硕士研究生1名，目前在读博士研究生3名毕业、硕士研究生1名。课题负责人受邀参加国际交流大会3次。