鞘柄乌头抗肿瘤镇痛的活性成分及机制研究

鞘柄乌头是湖北民间使用的一种药用草乌，多年来该草药在鄂西民间广泛用于各种疼痛的治疗，疗效显著且无成瘾性。本课题组在进行湖北省自然科学基金"鞘柄乌头镇痛的活性物质及机理研究"时通过广泛的活性筛选发现其镇痛活性部位生物碱部位能抑制肿瘤细胞的增殖，申请者通过活性导向分离法追踪出该部位抗肿瘤镇痛的活性中心A1。本课题拟采用各种先进的分离分析方法结合多靶点的药理学筛选技术,阐明A1抗肿瘤镇痛的活性成分，并从细胞水平和分子水平研究活性成分抗肿瘤镇痛的机理。

本课题对鞘柄乌头抗肿瘤镇痛的活性成分进行了研究。首先采用小鼠醋酸扭体法和热板法对鞘柄乌头总膏及不同部位进行了镇痛作用筛选，实验结果表明总膏和生物碱部位均具有一定的镇痛作用；对总膏和不同部位的体外抗肿瘤活性部位筛选结果表明总膏及其生物碱部位对体外培养的人胃癌 AGS 细胞株、人肝癌 Hepg2 细胞株和人肺癌 A549 细胞株增殖均具有较强的抑制活性；以上结果表明鞘柄乌头抗肿瘤镇痛的活性部位是生物碱部位。其次对鞘柄乌头的化学成分进行了研究，从中分离得到的 21个化合物中，其中18个化合物均为首次从该植物中分离得到。从鞘柄乌头抗肿瘤镇痛的活性部位生物碱部位分离得到 12 个化合物，分别为酰胺类生物碱和二萜生物碱，其中6个为新化合物：2-[2’-(2’’-羟基-2’’-甲基-丙酰胺)]-苯甲酰胺]-苯甲酸甲酯、2-[2’-(2’’-羟基-2’’-甲基-丁酰胺)]-苯甲酰胺]-苯甲酸甲酯、4-羟基-2-[2’-(2’’-羟基-2’’-甲基-丙酰胺)]-苯甲酰胺]-苯甲酸甲酯、2-[2’-(2’’-羟基-2’’-甲基-丙酰胺)]-苯甲酰胺]-4-甲氧基-苯甲酸甲酯、鞘乌宁、鞘乌碱。最后采用MTT法检测了12个生物碱单体对肿瘤细胞增殖的抑制作用，实验结果表明12个生物碱对对人胃癌AGS细胞株、人肝癌Hepg2细胞株和人肺癌A549细胞株的增殖均具有较强的体外抑制活性，并且对人胃癌细胞AGS细胞株的增殖抑制作用强于阳性药。本课题从急性毒性和化学结构两个方面揭示了鞘柄乌头毒性较小的根本原因，分析了鞘柄乌头二萜生物碱中产生镇痛作用的主要成分是高乌甲素。