多药耐药转运蛋白（P-gp）三维结构和结直肠癌化疗耐药相关性研究

ABC转运蛋白家族中的多药耐药转运蛋白（例如P-gp）是恶性肿瘤产生耐药的重要机制之一。许多分子生物学和生化研究已证实多药耐药转运蛋白过度表达和抗肿瘤药物耐药有直接关系，但P-gp蛋白突变尤其是底物结合区的突变是否和化疗敏感性相关尚不清楚。本研究针对接受化疗的晚期结直肠癌患者，首先通过P-gp的三维同源模型选取12个跨膜片段（TM）中参与底物结合和转运的氨基酸位点，然后提取肿瘤组织和血清DNA并对相应位点的DNA片段进行测序。最后比较上述位点是否存在突变，同时结合临床化疗疗效资料，了解相关的突变点（区）是否与原发耐药或继发耐药存在相关性。在此基础上利用蛋白结构模拟软件从分子水平上阐述P-gp蛋白转运多种细胞毒药物的机制。为将来临床化疗方案个体化选择提供理论依据，为新药的研发提供实验数据。

本课题研究方向为多药耐药蛋白在结直肠癌治疗中耐药的相关研究。在第一部分研究中通过多态性分析MDR1和ABCG2是否与伊立替康疗效相关，研究结论仅MDR1 2677 G>T/A可能与疗效相关。在ABCG2蛋白跨膜区域序列测序中没有发现与耐药相关的突变，故未能进一步行3D同源模型模拟来探索耐药机制。同时，也针对ABCG2在肿瘤组织的表达情况进行相关研究，未发现其表达与化疗耐药相关。因此第二部分研究转入探讨靶向药物治疗和耐药在结直肠癌中的机制研究。主要研究靶点是关于HER家族的两个重要成员HER1和HER2。首先我们发现HER2阳性的直肠癌占所有直肠癌比例约为4%。并通过2代测序对HER1靶点的抗EGFR抗体药物耐药机制进行相关研究。本课题已经分别在《中华胃肠外科杂志》和《中国临床肿瘤》发表文章1篇。第三篇文章是关于HER2在直肠癌活检和手术标本比对的文章已经投稿至《中华胃肠外科杂志》。目前正在撰写关于应用2代测序技术探索抗EGFR抗体耐药相关的文章，预计今年3月份完成。