勃起神经冷冻损伤性勃起功能障碍的脂质干细胞治疗研究

勃起神经损伤是前列腺癌冷冻手术后最常见的并发症，易导致勃起功能障碍（ED）的发生。勃起神经的再生，有助于ED的治疗。脂质干细胞（ADSC）的多向分化及生长因子分泌能力，可以促进包括神经在内多种组织损伤的修复。本课题拟从三个方面来研究ADSC对于勃起神经冷冻损伤性ED的治疗作用：（1）研究ADSC促神经生长作用及在阴茎海绵体组织中的分化去向，为ADSC用于勃起神经损伤的治疗提供依据；（2）结合本课题组的前期研究，采用NGF 腺病毒表达载体转染ADSC，后检测其多向分化能力及多种神经生长因子的表达，为ADSC作为基因治疗载体提供依据；（3）我们将利用ADSC，诱导分化型ADSC和转染有NGF 腺病毒表达载体的ADSC来治疗大鼠勃起神经的冷冻损伤，观测并比较这些细胞在体的神经生长因子分泌作用，促勃起神经修复作用及引起的免疫反应情况，从而验证并比较三者对于勃起神经冷冻损伤所致ED的治疗作用。

勃起神经损伤是前列腺癌冷冻手术后最常见的并发症，易导致勃起功能障碍（ED）的发生。勃起神经的再生，有助于ED 的治疗。脂肪干细胞（ADSC）的多向分化及生长因子分泌能力，可以促进包括神经在内多种组织损伤的修复。本课题从三个方面来研究ADSC 对于勃起神经冷冻损伤性ED 的治疗作用：.第一部分，我们首先分离鉴定出大鼠ADSC，并且初步研究了ADSC的促神经再生作用。研究显示，大鼠ADSC(RADSC）分泌神经营养因子VEGF, NGF, Neurturin的水平显著高于大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（RCSMC）；而CNTF，NT3虽然有增高的趋势，差异并不显著。同时，我们还发现RADSC能够显著促进盆腔神经节（MPG）神经纤维的生长。我们进一步追踪ADSC在大鼠体内的存活和分布情况，发现ADSC进入体内后由阴茎组织向MPG转移，但经四周后，存活较少，提示ADSC主要通过旁分泌作用促进神经再生。 .第二部分，为提高ADSC对阴茎冷冻损伤的治疗效果，我们构建了NGF-GFP慢病毒转染的ADSC。结果显示，与ADSC相比，NGF转染ADSC后，能促进NGF、VEGF的分泌，而对neurturin、CNTF的分泌无显著影响。我们进一步发现，NGF转染的ADSC对于MPG神经纤维生长的促进作用显著强于ADSC。.第三部分，我们在大鼠模型中验证，NGF转染的ADSC对于勃起神经冷冻损伤相关ED的治疗作用显著优于ADSC。其作用机制主要是通过促进神经营养因子NGF，VEGF的表达，增加nNOS阳性神经数量，减少细胞凋亡来达到改善作用。而对于营养因子neurturin，炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10，TNF-α的表达，NGF转染的ADSC治疗组与普通ADSC治疗组无显著差异。.综合以上结果，我们发现了ADSC是一种基因治疗的良好细胞载体，修饰后的ADSC可以显示出优于普通ADSC的治疗效果。NGF修饰的ADSC可以显示出对冷冻损伤性ED的良好治疗效果。治疗效果主要来源于治疗细胞的分泌的各种生长因子，而不是源于ADSC本身的分化。我们的研究结果为冷冻相关性ED的治疗提供了新的方向。