肝硬化假小叶显微三维结构的形态学研究

各种慢性肝病均破坏肝小叶结构，肝硬化时假小叶形成，肝脏丧失正常功能，临床后果严重。因缺乏有效观察肝小叶显微三维结构(3D)的手段，肝硬化假小叶显微立体结构尚不明确。连续病理切片加计算机辅助三维成像法因切片间对位精度低，重建图像准确性较差。同步辐射硬X线相位衬度微CT（SRX微CT）具有高密度分辨（轻元素成像对比度比临床CT显著提高）、高空间分辨（微米）和低辐射损伤的特性，是获取肝脏显微3D结构的理想手段。应用此技术，我们已初步获得正常肝小叶的三维结构。本课题拟应用SRX微CT并以连续病理切片重建法为参照，系统研究假小叶显微三维结构，从立体角度进一步阐明肝硬化的病理形态学特点，为SRX微CT逐步发展成为无创伤性诊断肝硬化新影像学手段提供实验依据。

通过DEI方法观察到，正常大鼠肝内微血管主干和分支血管管壁光滑，血管分支清楚有层次。四氯化碳注射6周后，肝内微血管逐渐增加，血管弯曲、不规则。四氯化碳注射10周后，肝内微血管数量明显增多，微血管网状结构紊乱，呈现毛刺状。停止四氯化碳30周时，血管的毛刺样结构消失，但管壁仍然弯曲，僵直。进一步分析得出，与对照组相相比，纤维化组大鼠（四氯化碳注射6周）血管密度增加了1.4倍，肝硬化组大鼠（四氯化碳注射10周）血管密度增加2倍。与之相应，血管之间的相对距离逐渐减小，对照组大鼠的血管之间相对距离是673.85 ± 214.16 μm，而纤维化组大鼠及肝硬化组大鼠的血管之间距离分别为563.89 ± 243.35 μm、392.9 ± 92.68 μm。停止四氯化碳注射自发逆转组，与肝硬化组大鼠相比较，逆转组大鼠的血管密度下降了0.7倍，血管间的相对距离却相应的增宽至548.60 ± 210.94 μm。CD34定量分析可见，与正常对照组相比较(7.1 ± 2.3)，肝纤维化组(9.42 ± 2.12，P＜0.01)与肝硬化组(14.4 ± 3.11，P＜0.01)血管密度明显升高；经过30后的自发逆转，逆转组大鼠血管密度较肝硬化组下降约0.6倍（P＜0.05）。这与之前同步辐射观察到的结果是一致的。