PTEN/PI3K/AKT途径调控p57亚细胞定位在原发性肝癌发生发展中的作用

既往研究表明，Cip/Kip家族成员p57不同的亚细胞定位可调控肿瘤细胞增殖和迁移。PTEN/PI3K/AKT途径异常是原发性肝癌（HCC）发生发展中常见的分子事件，在调控Cip/Kip蛋白表达和亚细胞定位中发挥重要作用。我们前期研究发现：p57下调促进HCC的增殖，且能在胞浆中与LIMK1作用调控HCC侵袭，而PTEN过表达可使p57表达上调。本课题拟通过构建稳定表达p57不同突变体的HCC细胞株，在体内、外分别检测p57亚细胞定位对HCC细胞生物学行为的影响；利用PTEN特异性敲除小鼠和DEN诱导的小鼠HCC模型，结合蛋白质磷酸化位点分析和染色质免疫共沉淀等方法，分析PTEN/PI3K/AKT途径对p57表达和亚细胞定位的调控模式，阐明PTEN/PI3K/AKT途径调控p57亚细胞定位在HCC发生发展中的作用，为深入探索HCC的发病机制，寻找HCC治疗的新靶点提供理论依据。

既往研究表明，Cip/Kip家族成员p57不同的亚细胞定位可调控肿瘤细胞增殖和迁移。PTEN/PI3K/AKT途径异常是原发性肝癌（HCC）发生发展中常见的分子事件，在调控Cip/Kip蛋白表达和亚细胞定位中发挥重要作用。首先，我们通过基因转染，研究了p57及其不同结构域对肝癌细胞的生物学行为的影响；然后，我们又通过免疫荧光技术研究了pten对p57亚细胞定位影响；最后，通过构建SD大鼠肝癌模型，进一步验证了pten与p57的关系。我们研究发现：1.p57及其不同结构域均可以促进Hep3B细胞凋亡、迁移、侵袭作用，与NC组相比，QT结构域组在细胞凋亡、迁移、侵袭中的作用较p57全长组和CDK组强，而CDK结构域组可以引起细胞G0/G1期阻滞效应；2. BEL7402-ShP57-PTEN细胞中PTEN和P57蛋白表达水平明显高于BEL7402-ShP57-NC细胞，Hep3B-P57-siPTEN细胞中，胞核中P57的表达水平明显降低；3.在人和大鼠肝癌中，pten与p57表达呈正相关。阐明了p57及不同结构域对肝癌细胞生物学行为的影响，而PTEN可以通过调控p57的表达水平和亚细胞定位来改变其在HCC发生、发展的作用，为寻找HCC治疗的新靶点提供理论依据。