东北野生大豆渗透胁迫基因的克隆及其功能分析

在大豆分子育种中抗逆基因资源匮乏，严重制约了大豆优良新品种的培育。东北野生大豆具有丰富的抗逆基因资源，是基因克隆的理想材料。本研究以东北野生大豆为试材，在不同时间进行盐处理诱导基因表达，构建全长cDNA文库, 制备基因芯片。以处理和未处理的混合RNA为探针与芯片杂交，筛选出差异表达的独立克隆，并进行序列分析和归类，绘制不同时间渗透胁迫条件下基因表达谱；同时以渗透胁迫相关的调控基因DREB、CDPK、MAPK的保守序列为探针进行芯片杂交，筛选出东北野生大豆与渗透胁迫相关的调控基因。对筛选出的克隆进行同源性分析，初步确定其类型与功能。对烟草遗传转化，鉴定在渗透胁迫条件下筛选克隆的功能。.通过本研究，获得东北野生大豆在渗透胁迫条件下的基因表达谱，并得到具有独立知识产权的、对植物抗渗透胁迫起重要作用的新基因，为大豆基因工程研究创造基因资源，并为抗逆分子育种奠定理论基础。