苦杏仁与桔梗止咳、平喘、祛痰的配伍比例和机制研究

苦杏仁-桔梗，是临床上用于止咳、平喘、祛痰的经典药对，在《景岳全书》等中医药古籍中多有记载；目前市售中成药中含此药对、且用于止咳、祛痰、平喘的即达30余种。而二者最佳配伍比例和配伍增效机制目前尚无系统研究。.本研究拟通过镇咳、平喘、祛痰试验，对二者配伍的合理性进行论证；寻找最佳药效的配伍比例；并通过确定镇咳作用靶点、测定气管纤毛运动功能、痰液和黏蛋白分泌量、血液和肺泡灌洗液中相关炎性细胞和因子、气道和血管的舒缩性介质，观察支气管病理形态学改变，考察苦杏仁和桔梗配伍用于止咳、平喘、祛痰的作用机理和配伍增效机制。.通过以上研究，明确回答：①二者配伍是否增效；②二者配伍在哪些作用上增效；③二者配伍产生最佳疗效的比例是什么；④二者配伍的增效机制是什么。从而为苦杏仁-桔梗在临床上的合理应用提供科学依据，丰富中医药理论。

本研究对苦杏仁、桔梗及二者配伍的止咳、平喘、祛痰作用进行系统药效学研究，初步阐明二者配伍的合理性，并进一步明确二者配伍在哪些方面增效以及二者配伍的最佳比例和配伍增效机制，为苦杏仁和桔梗的临床合理应用提供科学依据，丰富中医药理论。.苦杏仁、桔梗及二者配伍的止咳作用研究：采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法制备咳嗽模型，观察其咳嗽潜伏期和咳嗽次数；制备卵白蛋白致哮喘豚鼠模型，分别采用放射免疫法、酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫组化测定神经源性介质降钙素基因相关肽（CGRP）、神经肽B和P物质（SP）的水平。二者平喘作用研究：制备乙酰胆碱合用磷酸组胺致哮喘豚鼠模型，观察哮喘潜伏期；制备卵白蛋白致哮喘豚鼠模型，分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法和ELISA测定血液中气道舒缩性介质内皮素（ET）、一氧化氮（NO）和可溶性细胞粘附分子-1（ICAM-1）水平，采用全自动血液分析仪对嗜酸性粒细胞（EOS）和白细胞（WBC）计数，并对肺组织进行病理形态学观察。二者祛痰作用研究：采用小鼠酚红排泌法，测定小鼠气道酚红排泌量（OD值）；采用大鼠毛细管排痰量法，测定气管的排痰量；制备脂多糖致大鼠肺粘液高分泌模型，采用ELISA法测定肺泡灌洗液（BLAF）中TNF-α和IL-8水平，采用HE染色，观察肺组织形态学变化；采用阿辛蓝-过碘酸雪夫染色（AB-PAS），检测杯状细胞分泌粘蛋白的功能，采用免疫组化染色，检测肺气道上皮细胞MUC5AC蛋白的表达。.结果显示，苦杏仁、桔梗及二者配伍均具有显著的止咳、平喘、祛痰作用；在止咳、平喘、祛痰作用上，苦杏仁和桔梗有配伍增效作用。二者配伍用于止咳的最佳配伍比例是1:1；用于平喘和祛痰的最佳配伍比例均是1:2。苦杏仁和桔梗在止咳方面的配伍增效作用表现为：延长咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数及降低神经源性介质CGRP和SP水平的作用强于单味苦杏仁或单味桔梗。苦杏仁和桔梗在平喘方面的配伍增效作用表现为：延长哮喘潜伏期、减少炎性细胞的数量和分泌、降低收缩性介质（ET）和炎症因子（ICAM-1）水平的作用强于单味苦杏仁或单味桔梗。苦杏仁和桔梗在祛痰方面的配伍增效作用表现为：增加气管的排泌功能和痰液的分泌量、减少炎性细胞及炎症介质的数量和分泌、减少肺泡中粘蛋白的分泌及下调粘蛋白MUC5AC蛋白的表达强于单味苦杏仁或单味桔梗。