Bt蛋白和伏马菌素B1的联合肠道免疫毒性及其机理研究

伏马菌素B1（FB1）是我国粮食的主要污染物之一，对玉米、大米等主要粮食污染严重。如果转Bt基因粮食受到FB1污染，粮食中就同时含有Bt蛋白和FB1两种毒素，这两种毒素都具有一定的免疫毒性，但是他们的相互作用（相加、协同还是拮抗）还不清楚，因此，研究Bt蛋白和FB1的联合肠道免疫毒性及其机理，对于明晰这两种毒素的相互作用，保障人们健康，具有重要意义。本项目拟分别以纯化的Bt蛋白和FB1为材料，通过体外培养肠道淋巴细胞，从细胞水平、分子水平、生化水平等层面揭示Bt蛋白和FB1联合对小鼠肠道淋巴细胞的免疫毒性及机理；分别用转Bt基因大米、FB1、转Bt基因大米+FB1、Bt蛋白、Bt蛋白+FB1配制鼠粮，通过小鼠体内实验，从系统水平、分子水平、细胞水平、生化水平等层面揭示Bt蛋白和FB1联合对小鼠肠道黏膜免疫系统的毒性及机理。为转Bt基因作物的推广及其粮食毒素限量标准制定提供依据。

伏马菌素B1（FB1）是我国粮食的主要污染物之一，对玉米、大米等主要粮食污染严重。同时，近年来转Bt基因粮食更为普遍地进入人们的食物链。如果转Bt基因粮食受到FB1污染，粮食中就同时含有Bt蛋白和FB1两种毒素，有可能对人和动物的肠道免疫系统造成损害。本项目分别以纯化的Bt蛋白、转Bt基因大米、FB1为材料，通过体外培养和小鼠体内试验，从分子、细胞和生化等层面系统研究了Bt蛋白和FB1联合对小鼠肠道粘膜免疫系统的毒性。按计划完成了项目的各项研究任务，具体如下：. （1）体外培养实验表明，纯化的Bt蛋白、FB1都可以明显降低肠道PP结淋巴细胞（PPL）分泌IL-2的功能，明显抑制肠道PPL细胞和IEL细胞的增殖及其分泌IL-2和IL-10的功能，并且Bt蛋白和FB1联合具有一定的累加作用，但未发现明显的协同作用。. （2）小鼠喂养实验表明，大米在经过Bt基因修饰后，其营养价值和对小鼠生长发育、免疫器官指数、血液和血清生化指标、迟发型变态反应（DTH值）、溶血空斑实验（PFC值）、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数、血清抗体滴度等指标的影响，与亲本大米基本一致。表明转Bt基因大米未对小鼠免疫功能产生不良影响。. （3）小鼠喂养实验表明，FB1可以显著降低小鼠CD4+/CD8+值、IL-2分泌；通过常规微生物培养计数未发现转Bt大米饲料和FB1对小鼠肠道微生物的影响；PCR-DGGE结果表明FB1组和Bt+FB1组小鼠肠道菌群数量显著低于Bt组和C组。表明FB1可以显著降低小鼠肠道粘膜免疫，而Bt蛋白对小鼠肠道粘膜免疫没有影响，Bt蛋白和FB1也没有联合作用。. （4）老年小鼠喂养实验表明，FB1可以更为显著降低老年小鼠CD4+/CD8+值、IL-2分泌；PCR-DGGE结果表明FB1组和Bt+FB1组老年小鼠肠道菌群数量更为显著低于Bt组和C组。表明FB1可以更为显著降低老年小鼠肠道粘膜免疫，而Bt蛋白对老年小鼠肠道粘膜免疫没有影响，Bt蛋白和FB1也没有联合作用。. 发表相关论文7篇，其中SCI论文1篇，中文核心文章6篇，投稿SCI文章2篇；项目主持人邢福国于2010年晋升为副研究员，培养博士1名，硕士2名；本团队主办2014年5月19日-23日在北京召开的国际真菌毒素大会；先后邀请外国专家来华合作研究3人次，来华做学术报告8人次；出国参加学术会议4人次。