PXR共转染报告基因系统高通量筛选CYPs诱导剂

根据人孕烷X受体（hPXR）转录活化机制及对CYP3A4、CYP2C9及CYP2B6的基因调控作用，应用RT-PCR、PCR，基因克隆及重组技术和报告基因技术，分别构建CYP3A4/CYP2C9/CYP2B6启动子报告基因和表达hPXR的质粒，稳定转染人源细胞株，建立高通量筛选CYPs诱导剂的细胞模型。在候选化合物作用下，应用微孔板检测报告基因中特异酶的表达情况，间接测定化合物诱导CYP3A4/CYP2C9/CYP2B6的能力。并应用原代培养的人肝细胞和凝胶电泳迁移率分析法（EMSA）评价该药物筛选模型的灵敏性及特异性。该细胞水平药物筛选模型的建立可使高通量筛选CYPs诱导剂成为可能，从而指导新药开发和临床合理用药，预测药物相互作用，避免不良反应的发生。具有很高的科研价值和商业价值。