微小RNA378增进肿瘤细胞自我更新，耐药性，分化能力和致瘤性及机制的研究

肿瘤干细胞在肿瘤的发生、发展、复发和转移中起着重要作用，微小RNA可作为癌基因促进肿瘤生长。微小RNA促进肿瘤生长作用与肿瘤干细胞有何种联系？目前尚无定论。我们前期研究发现，临床肿瘤标本高表达微小RNA378并伴有肿瘤干细胞自我更新标志物（如Sox2）的高表达，且微小RNA378转染的细胞具有更强的肿瘤干细胞特性，为此我们将进行微小RNA378增强 SGC7901和K562等肿瘤细胞的肿瘤干细胞功能研究。用微小RNA378转染细胞，研究微小RNA378增进SGC7901和K562等肿瘤细胞自我更新、耐药性、细胞分化和肿瘤形成能力等肿瘤干细胞功能；同时进行微小RNA378靶基因分析、RNA干扰试验、基因拯救试验等，对其机制进行分析和研究。分析微小RNA378与临床肿瘤之间的关系、微小RNA378与肿瘤干细胞的关系，阐明微小RNA378在肿瘤形成中的作用和机制，为将来肿瘤治疗提供新的思路。

肿瘤干细胞在肿瘤的发生、发展、复发和转移中起着重要作用。微小RNA可以作为致癌基因促进肿瘤生长。本研究通过检测微小RNA-378 （miR-378）转染细胞耐药性、自我更新能力、分化能力、肿瘤形成能力等，分析miR-378在提高肿瘤细胞干细胞特性的作用及机制，探讨miR-378在促进肿瘤干细胞的形成中的作用。研究结果发现采用RQ-PCR方法检测23例消化道肿瘤样本中miR-378的表达情况，显示16例样本的肿瘤组织miR-378的表达增高；101例乳腺癌样本中有50例表达增高，84例白血病患者样本中有26例高表达miR-378，证实miR-378与肿瘤的发生相关；miR-378转染细胞具有抵抗Cytarabin、Methotrexate诱导细胞死亡的作用；转染miR-378的肿瘤细胞表达较高水平的自我更新标志物c-myc、Oct4、Sox2和Nanog，以及较高水平的CD133；采用流式细胞术检测侧群细胞结果显示转染miR-378的肿瘤细胞其侧群细胞含量明显增加，并具有统计学意义。另外，转染miR-378的肿瘤细胞在干细胞培养基和软琼脂培养基中形成较多较大的肿瘤球和细胞克隆；转染miR-378的细胞生长加快，且其侵袭能力和迁移能力增加；Oil-Red-O染色结果显示miR-378能够诱导分化更多的脂肪性细胞；动物体内模型试验证明miR-378能够促进肿瘤的形成，并具有促进肿瘤转移的作用；机制研究发现波形纤维蛋白Vimentin是miR-378的靶基因。上述结果证实miR-378能够显著提高肿瘤细胞的干细胞特性，并通过调节波形纤维蛋白Vimentin来增进肿瘤细胞的自我更新、耐药性、分化能力和致瘤性。本研究首次揭示miR-378通过增强肿瘤干细胞特性而促进肿瘤的发生发展，为恶性肿瘤治疗提供新的研究思路，为开发新的抗肿瘤药物奠定基础。