涡虫副胚层干细胞特异性microRNA的筛选及其在再生中的作用研究

淡水涡虫是一种具有强大的再生能力的扁形动物，当身体受损时，称为副胚层的干细胞群便会分化成相应的器官，因此涡虫是一种非常好的干细胞和再生研究模式生物。microRNA作为一类重要的非编码小RNA，在生命活动中起重要的调控作用，但其对损伤修复和再生的调控作用和分子机理尚未见任何报道。本项目拟利用我们建立的一种新型差减杂交法，构建涡虫干细胞microRNA差异表达文库，筛选特异性高表达及低表达的microRNA序列，通过northern杂交和定量PCR等方法研究其在不同组织和发育时期中表达水平，生物信息学预测和实验验证确定其靶基因，并利用反义核酸技术，建立副胚层中特异性microRNA上调和下调的涡虫个体，观察其靶基因表达变化和副胚层再生功能的改变，并进一步通过RNAi技术验证。初步阐明microRNA在再生过程中的调控作用及分子机制，为再生生物学和再生医学提供新的研究思路。