应用反转录PCR法从3个人胎肝细胞中获取肝豆状核变性基因cDNA表达片段WC1。该表达片段为3.4Kb,经测序分析与报道的WD基因cDNA序列一致。以逆转录病毒Pzip为载体,我们构建了Pzip-WC1基因重组体,酶切位点为SalI切点。将重组体感染5例肝豆状核变性患者及杂合子离体培养的肝细胞中,获得较高表达的反义RNA,采用Western -blot蛋白印迹法和ATP酶检测法,检测了肝豆状核变性患者及杂合子离体培养肝细胞中的WD基因表达情况和其产物P型ATP酶活性的变化,初步揭示了WD的分子发病机制,对肝豆状核变性的基因治疗有一定的临床价值。
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数据更新时间:2023-05-31
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