铁及铁蛋白，转铁蛋白在对虾抗WSSV感染中的作用研究

铁是许多酶的辅助因子，在天然免疫中有重要作用。对虾白斑综合症病毒（WSSV）是危害对虾养殖业的主要病害，其基因组编码的核糖核酸还原酶（RR）在病毒复制过程中起重要作用，铁是该酶的辅基。本项目通过研究铁对WSSV核糖核酸还原酶表达水平和生物活性的影响，研究对虾铁的摄入与WSSV感染的关系，探讨通过调控WSSV复制过程中核糖核酸还原酶来控制抑制病毒增殖的可能性；研究对虾铁代谢相关蛋白转铁蛋白（transferrin）,铁蛋白(ferritin)及这些蛋白在对虾抗WSSV病毒感染过程中的变化与作用，探究铁在对虾抗WSSV感染过程中的作用以及对虾transferrin，ferritin在对虾免疫中的作用。预期成果可为控制对虾WSSV感染提供新途径、新方法，有利于进一步阐明对虾的免疫机理，丰富天然免疫理论，同时可以为对虾养殖防病抗病以及良种培育提供分子水平的理论依据。

对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus，WSSV)毒力极强，对全球养殖对虾危害巨大。 由于WSSV病毒基因组编码的核糖核苷酸还原酶需要铁作为辅助因子，因此研究对虾铁的摄入与WSSV感染的关系，以及研究对虾铁代谢相关蛋白及这些蛋白在对虾抗WSSV病毒感染过程中的变化与作用，有助于阐明铁对WSSV感染的影响及对虾抗WSSV感染的分子机制，了解对虾的免疫机理。本研究成功克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei）的ferritin基因，原核表达并制备了对虾ferritin、WSSV病毒的核糖核酸还原酶（RR)、对虾翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）等蛋白的抗体，分析了这些基因与蛋白在WSSV感染过程中的变化，发现抑制对虾ferritin、TCTP基因表达会促进WSSV病毒的复制，其病毒的拷贝数相差达6倍之多；相反，如果向对虾注射原核表达的ferritin蛋白（> 0.5 ng /g对虾）时或者TCTP蛋白（> 0.6 ng /g对虾）时，则可以有效抑制WSSV病毒的复制，从而减少对虾死亡率，其对病毒的抑制率分别为45%和28%，在试验期内的对虾死亡率分别降低31.5%和20.8%。本项目的研究还发现，柠檬酸铁铵ferric ammonium citrate(FAC)会轻微促进病毒的复制，而去铁胺deferoxamine (DFO)则可以有效地抑制病毒复制。本研究结果表明，铁影响WSSV病毒在对虾体内的复制，铁代谢相关蛋白ferritin, TCTP可以抑制病毒的增殖，提高WSSV病毒感染对虾的存活率。本课题的研究结果，为WSSV病毒的防控提供了新的选择。