STI571耐药性bcr/abl酪氨酸激酶域特异性抑制肽的筛选与鉴定

CML患者在接受STI571治疗期间复发耐药的主要原因是Bcr/Abl酪氨酸激酶域发生突变,失去与该药结合的能力,但仍能与ATP结合,重新活化Bcr/Abl酪氨酸激酶,因此，研究与突变型Bcr/Abl激酶域竟争性结合的多肽,有可能达到克服耐药性的目的。本研究拟通过基因重组方法,获得突变型Abl激酶域的重组蛋白,并将其固定在载体上，利用噬菌体肽文库展示技术，筛选出与突变型激酶域结合的噬菌体克隆，经扩增、再筛选后，获得与突变型Abl激酶域具有特异性结合能力的噬菌体克隆，在此基础上，对获得的噬菌体克隆进行测序，获得结合肽的氨基酸序列，并人工合成结合肽,测定对Bcr/Abl酪氨酸激酶活性的影响及对CML白血病细胞增殖、凋亡和分化的影响，期望能获得能与突变型Bcr/Abl激酶域结合的具有抑制性作用的结合肽，以达到逆转STI571耐药性的目的，为克服CML患者对STI571的耐药性提供新的治疗方法。