应用siRNA抑制HO-1mRNA表达以降低胆红素水平的研究

血红素加氧酶（HO）是哺乳动物和人血红素代谢的限速酶，有三种HO同工酶，其中HO-1为诱导酶，在肝脏、脾脏中浓度最高。HO-1直接调控血清胆红素水平。因此，抑制HO-1活性，是阻断胆红素产生，防治新生儿高胆红素血症的有效途径。本课题设想根据siRNAs 设计的原理和要求，辅助计算机分析设计，化学合成针对人和大鼠HO-1 基因序列各三个位点柄-环发夹式siRNAs；g-P32-ATP标记、含去涎酸胎球蛋白脂质体包埋，转染人和大鼠肝脏细胞，Dot Blot检测转染率，RT-PCR和Western Blot检测siRNAs剪切HO-1 mRNA的能力，筛选有效siRNA；hHO-1和rHO-1 siRNAs体外转染肝脏细胞；rHO-1 siRNA尾静脉注射黄疸SD大鼠，检测产物胆红素浓度，研究siRNA在胆红素形成之前阻断其产生作用，为临床早期防治新生儿高胆红素血症探索一条有效新途径。