本研究将酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)基因加上IL-2R信号肽序列,定向插入PMAMnea真核表达载体。转染COS7细胞并检测到较高的aFGF表达。进而构建逆转录病毒表达载体PLXSN-SP-aFGF,转染后筛选出高滴度的PA317色装细胞克隆。PCR检测证明载体序列整合到基因上;原位杂交显示细胞中存在大量病毒颗粒。在获得原代培养的新生大鼠大脑皮层星形胶质细胞基础上,用多组的逆转录病毒转染了新生星形胶质细胞。经原位杂交观察到转染的胶质细胞aFGFmRNA水平较高Western blet和ELISA检测表明转基因的星形胶质细胞能够分泌表达较高水平的aFGF。这一工作为开展植入转染FGF基因的星形胶质细胞治疗脑损伤奠定了基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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