HECT型泛素连接酶Smurf对RING型泛素连接酶HDM2的稳定性调控研究

泛素化修饰是许多抑癌基因、癌基因活性及稳定性调控的重要方式之一。RING型泛素连接酶HDM2参与调控p53的转录因子活性及蛋白稳定性，与肿瘤的发生高度相关，但HDM2如何被调控的仍未完全清楚。在前期研究中我们发现一个有趣的现象，即HECT型泛素连接酶Smurf1能够增强HDM2的稳定性，随后我们运用RNAi实验、泛素化实验、半衰期检测等多种方法多角度确证Smurf1通过抑制HDM2自身泛素化而增强其蛋白水平。免疫共沉淀实验表明Smurf1与HDM2存在相互作用。本项目拟采用蛋白-蛋白相互作用研究技术、体内体外泛素化实验、细胞周期、细胞凋亡检测等手段分析Smurf1/2对HDM2的调控机制及其生物学意义。研究有助于理解HDM2调控机制，加深对Smurf生物学功能的认识，揭示不同类型泛素连接酶之间的互作关系，进一步完善p53-HDM2调控网络。