雌激素受体alpha在雌激素缺乏状态下对肝脏胆固醇代谢的影响及其机制研究

心血管疾病（CVD）的发病率和死亡率均居各类疾病的首位。绝经后女性雌激素水平降低导致血中胆固醇水平升高是诱发CVD的独立风险因素。研究表明雌激素具有促进胆固醇清除的作用，绝经后女性血中胆固醇上升主要由雌激素缺乏导致的胆固醇清除障碍而引起。然而针对雌激素缺乏状态下胆固醇代谢的研究较少，且争议较大。申请者在前期研究补钙对绝经后女性胆固醇水平影响中发现，补钙可以通过对雌激素受体alpha（ER-alpha）的调节而影响胆固醇的代谢，而ER-alpha作为雌激素发挥作用的重要靶点，其对胆固醇代谢的调节研究尚未明确。因此，项目拟通过体内外试验相结合的方法，采用基因芯片、基因沉默等分子生物学技术对ER-alpha在雌激素缺乏状态下对胆固醇代谢的影响及机制进行研究，为我国绝经期女性胆固醇紊乱状态的膳食干预及临床防治提供新的靶点，为开发防治绝经后女性胆固醇紊乱、降低CVD发病风险的新型食品提供科学依据。

心血管疾病是威胁人类健康与生命的最常见疾病，其发病率和死亡率居世界首位。在众多引起心血管疾病的危险因素中，绝经是重要因素之一。绝经后女性血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平升高，而胆固醇水平升高是心血管疾病发生的独立风险因素，因此明确绝经女性胆固醇上升原因，改善绝经后女性胆固醇上升状态，是当今世界女性心血管疾病防治的重点和难点。.本项目通过动物及体外细胞实验研究雌激素受体在雌激素缺乏状态下对胆固醇代谢的影响。由于该课题是主持人博士课题的延伸，因此在项目进展中将补钙与雌激素缺乏这两个因素对胆固醇代谢的影响一并列出，虽然这样增加了实验本身的难度与数据分析的复杂性，但能够提供更多的有价值信息，有助于综合，深入阐述雌激素缺乏情况下体内胆固醇的变化规律以及雌激素受体alpha的可能作用机制。.目前已按计划完成全部研究内容，共发表SCI标注论文3篇，中文核心期刊1篇，培养博士、硕士研究生各1名，参加学术会议2次。具体研究结果如下：.1雌激素缺乏状态下，胆固醇分解代谢受到显著抑制，说明雌激素主要通过调节胆固醇分解代谢影响机体的胆固醇循环。.2 雌激素正常状态下，补钙呈现出一定的降低血中胆固醇作用，但雌激素缺乏与补钙协同作用显著提升血中胆固醇水平，这与胆固醇分解受到抑制引起。.3 雌激素缺乏状态下肝细胞内胆固醇合成未见增加，胆固醇分解能力显著降低。调节胆固醇合成的关键酶HMGCoA还原酶表达未发生变化，但胆固醇分解代谢关键酶CYP7A1表达受到显著抑制，其中SREBP-1c及SHP的表达的变化参与该调控过程。.4 过表达ER-alpha未引起胆固醇及胆汁酸改变。给予ER-alpha过表达细胞E2显著增加细胞内胆固醇水平，说明E2促进胆固醇合成的能力依赖于其受体alpha。E2显著刺激胆汁酸的分泌与是否转染ER-alpha无关。因此，在该细胞中雌激素对胆汁酸生成的调节不依赖于ER-alpha。.5补钙通过TRPC1通道导致肝脏内细胞内钙离子浓度的升高；升高的细胞内钙通过激活磷酸二酯酶降低胞内cAMP的水平；cAMP降低后依次通过上调固醇调节元件结合蛋白-1c以及SHP的表达抑制CYP7A1的表达，进而抑制胆固醇分解并导致血中总胆固醇水平的上升。在正常雌激素状态下，雌激素通过激活其受体G蛋白偶联雌激素受体阻断了补钙引起的细胞内钙浓度上升进而防止了血中胆固醇水平的上升。