促红细胞生成素的衍生物对慢性环孢素肾病的保护作用

本研究是通过建立慢性环孢素肾病的动物模型，研究促红细胞生成素（EPO)与其羧基化的衍生物(CEPO)能否有效拮抗环孢素肾毒性，发挥肾脏保护作用；体外培养肾小管上皮细胞和内皮祖细胞，研究不同浓度的EPO与CEPO对CsA 引起的肾小管上皮细胞和内皮祖细胞毒性的防治作用；从抗纤维化、抗炎症细胞浸润、抗凋亡、抗氧化、促进肾小管上皮和内皮细胞的新生以及对促进内皮祖细胞释放和增殖的影响等多个方面探讨EPO与CEPO肾脏保护的作用机制。本课题的意义为需长期使用钙调磷酸酶抑制剂（包括CsA和Fk506）的患者明显减少肾毒性的发生提供新的治疗策略，有效延缓慢性肾衰的进展，减少慢性移植物肾病的发生，提高移植器官的长期存活，为免疫抑制诱导期和维持期的治疗提供肾脏安全的保证，同时为开发防治环孢素肾毒性新型药物提供理论依据。

本研究是通过建立慢性环孢素肾病的大鼠动物模型，研究了促红细胞生成素羧基化的衍生物(CEPO)能有效拮抗环孢素肾毒性，通过抗纤维化、抗炎症细胞浸润、抗凋亡、抗氧化、促进肾小管上皮新生以及对促进内皮祖细胞释发挥肾脏保护作用，主要成果如下：.1.1对照组大鼠精神状态，活动，毛发等均无明显改变，模型组大鼠精神萎靡，活动减少，饮食下降，体重减轻，各给药组大鼠上述症状均有不同程度减轻。造模大鼠共死亡28只。.1.2对红细胞的影响： B组大鼠红细胞数在第5周显著降低，而各组明显能拮抗红细胞数下降。.1.3对血压影响：在2周D、E、F、G组舒张压和平均动脉压较A、B、C组明显升高。.1.4 对尿蛋白、尿钠、NAG酶的影响： B组大鼠尿蛋白、尿钠、NAG酶均显著升高，各给药组均显著降低。.1.5对尿肌酐的影响： B组大鼠尿肌酐显著降低，各给药组显著升高。.1.6对血肌酐、尿素氮的影响： B组大鼠血肌酐、尿素氮显著升高，各给药组显著降低。.1.7 对内生肌酐清除率的影响： B组大鼠内生肌酐清除率均降低趋势， E组显著升高。.1.8对肾组织MDA的影响： B组显著升高，各给药组显著降低。.1.9对肾组织GSH-PX的影响： B组显著降低，各给药组显著升高。.2肾小球和管周毛细血管内皮细胞再生.流式细胞仪分析血和肾脏组织中CD31+/CD 34+细胞数，EPO和CEPO能促进小球和管周毛细血管产生新生的内皮细胞，促进微血管形成。.3. 免疫荧光检测主动脉超氧化物的含量： B组荧光信号较弱，而各治疗组均有不同程度的增强。.4.肾脏病理.4.1肾组织纤维化：正常肾组织胶原纤维较少。B模型组胶原纤维增多，各治疗组胶原纤维表达均有不同程度的降低。.4.2对肾组织TGF-β1、Caspase-3与α-SMA表达的的影响：模型组较正常组，TGF-β1、Caspase-3与α-SMA呈过表达，各治疗组的表达呈不同程度的降低。.4.3对肾组织Ki-67的表达的影响：模型组较正常组，Ki-67呈低表达，各治疗组Ki-67的表达呈有不同程度的升高。.5. TUENL法检测肾组织细胞凋亡： B组凋亡指数显著升高，各组凋亡指数显著降低。.6.环孢素对肾小管上皮细胞生长周期的影响：CSA肾小管上皮细胞G1期比例升高，S期的比例明显下降，CEPO可以部分拮抗该效应.