芽孢杆菌载体质粒稳定性机理的研究

以短小芽孢杆菌稳秘质粒pNK289与芽孢杆菌的氯霉素乙酰基转移酶基因和β-内酰胺酶结构基因先后经二次随机重组，转化枯草芽孢杆菌AS1.1176，筛选到的转化子质粒均发生缺失或重排，选择传代稳定的质粒pNQ402和pCTH3第三次重组和转化后，筛选到在枯草芽孢杆菌AS1.1176和短小芽孢杆菌1037中结构和分离稳定的双抗性质粒pNQ4031，经培养100世代后，质粒保持率在98%以上。pNK289的衍生质粒pNQ402和pNQ219在枯草芽孢杆菌AS1.1176中培养100世代后质粒保持率分别为100%和0，拷贝数分别为57和5。两种质粒的限制酶图谱和DNA序列不同。pNQ219是滚环型复制模式，其分离稳定性与recE系统有关。