Disulfiram/Cu靶向杀伤急性髓系白血病干细胞的潜能及与NF-κB、ROS和JNK的关系研究

我们已证实Disulfiram(DS)与Cu螯合（DS/Cu）能通过抑制NF-κB杀伤肿瘤细胞。急性髓系白血病(AML)干细胞是导致AML治疗失败的最根本因素并伴NF-κB异常活化，那么，DS/Cu能否杀伤AML干细胞？我们预实验发现DS/Cu还能通过上调ROS和JNK活性诱导白血病细胞凋亡，并能抑制AML干细胞的增殖和诱导凋亡。而正常造血干细胞不存在NF-κB活化和JNK活化受抑，ROS水平低且抗氧化能力强。由此，我们推测DS/Cu具有靶向杀伤AML干细胞的潜能。本研究拟应用NOD/SCID移植鼠模型和甲基纤维素集落形成实验从体内外进一步明确DS/Cu靶向杀伤AML干细胞的潜能。采用EMSA及免疫印迹等方法检测DS/Cu处理前后ROS、NF-κB和JNK活性及凋亡相关蛋白表达的变化，并探讨各通路的相互作用，阐明DS/Cu靶向杀伤AML干细胞的分子机制，为将来应用提供更充分的科学依据。

急性髓系白血病（AML）干细胞是导致AML发生和发展的根本因素，AML干细胞对常用化疗药物不敏感，即使是致死剂量的造血干细胞移植预处理也难以完全杀灭处于休眠状态的AML干细胞，未被清除的AML干细胞还能继续维持疾病，最终导致治疗失败。此外，联合化疗及造血干细胞移植等经典的治疗手段均会损伤正常造血干细胞造成治疗相关毒性，相当一部分患者是死于化疗的毒副作用而不是白血病进展。针对AML干细胞的靶向治疗才是AML最有效、最根本的治疗策略，寻找可以靶向清除AML干细胞而不累及正常造血干细胞的药物无疑是十分重要。我们证实了DS/Cu对AML干细胞具有靶向的杀伤作用并针对其作用机制进行了深入的研究。首先，我们分选了CD34+CD38- AML干细胞，通过体外实验及NOD/SCID移植鼠模型进一步证实DS/Cu对AML干细胞的靶向杀伤作用。在对其作用机制的研究中发现，我们发现DS/Cu杀伤白血病干细胞作用机制是通过诱导细胞内的ROS水平、抑制Nrf2通路蛋白表达、上调JNK通路蛋白表达、下调NF-кB通路蛋白表达实现，而ROS是其中的关键。此外我们通过其他药物进一步证实了相关通路在白血病干细胞靶向治疗中的重要作用。我们的研究阐明了DS/Cu靶向杀伤AML干细胞的分子机制，为将来的临床应用提供了更充分的科学依据。