杨柳田头菇（Agrocybe salicacola）YAASM0711菌株不产孢子相关基因的分离及遗传变异研究

发掘新的种质资源，特别是具有特异性遗传性状和特殊用途的稀有资源，一直是食用菌行业研究工作的重心之一。无孢食用菌因其良好的商品性状和适用于孢子过敏群体而备受关注。为了明确杨柳田头菇（Agrocybe salicacola）无孢菌株突变位点遗传信息及群体遗传组成结构，本课题拟利用前期工作中获得的A.salicacola YAASM0711 200个单核及自交菌株为材料，运用细胞染色及扫描电镜技术，观察担孢子发育受阻滞的遗传行为。并通过AFLP-BSA技术，筛选突变位点紧密连锁分子标记，同时构建抑制削减杂交（SSH）文库，分离相关突变基因，进一步了解包括突变菌株在内的整个子代遗传结构。并深入分析突变位点遗传信息，准确理解担孢子发育相关基因的作用，推动研究者对担子菌有性生殖过程中分子遗传学行为的认识，为食用菌育种提供有力的理论依据。

无孢食用菌因其良好的商品性状和适用于孢子过敏群体而备受关注。本项目以前期获得的3个Agrocybe salicacola孢子缺陷型菌株为材料，经细胞染色观察，发现担孢子缺失突变菌株担孢子梗缺失，担子内没有明显的核分裂活动。利用AFLP的技术，从256对引物组合中筛选到了6个DNA差异标记，其中2个成功地转化为SCAR标记，单、双核菌株验证表明，SCAR分子标记准确、稳定；应用对比转录组结合SSH文库筛选得到了大量差异表达基因，其中36个注释为DNA错配修复，剪切修复及同源重组编码基因的片段在突变子实体中明显下调，这些基因片段可作为潜在的孢子发育相关候选基因。经表达模式验证，5个片段只在产孢菌株中表达，并在单核体群体中对这5个基因片段进行了DNA突变因素研究，结果显示Rad8基因在突变单核体基因组中属组成型缺失，而GTP-环式水解酶和细胞壁相关编码基因在突变和野生单核体中与型菌株中有较大差异，这些结果将有助于提高担孢子分子发育机理的认识。项目执行期间已发表论文4篇，其中SCI收录1篇，已推荐发表SCI 1篇，培养硕士研究生1名。