基于量子点酶辅助RCA放大荧光偏振分析用于miRNA高灵敏多重检测

The studies on the analysis of cancer markers are the key to improve the early diagnosis and treatment of malignant tumor. More and more studies confirmed that RNA molecules of peripheral circulating blood from cancer patients have biological characteristics associated with malignant tumor, and they can be used as sensitive and efficient tumor molecular markers. Then miRNA is a potential marker to develop the noninvasive diagnostics of malignant tumor. In this project, combining multicolor of quantum dots with hybrid cycle amplification and rolling cycle amplification reaction we will develop a new fluorescence polarization sensor platform for simple, sensitive and multiplex analysis of miRNA. The method we proposed will provides a reliable experimental support and theoretical basis for the non-invasive early diagnosis and prognosis of tumor therapy, at the same time, it has important practical significance to illustrate the miRNA biological function.

肿瘤标志物的高灵敏分析检测是提高恶性肿瘤早期诊断和治疗的关键。研究证实肿瘤患者外周血循环miRNA具有和恶性肿瘤相关的分子生物学特征，可作为敏感高效的肿瘤分子标志物，有望发展肿瘤无创诊断的新方法。该项目主要进行量子点标记探针用于外周循环血中标志物miRNA分子准确、灵敏、定量靶向诊断的应用基础研究，拟利用水相中合成的多色CdTe/ZnS核壳量子点偶联不同DNA分子作为荧光偏振信号探针，并结合指数放大系统及滚环扩增实现血液及细胞中的不同miRNA的同时测定，建立量子点标记探针对生物样品中miRNA分子靶向诊断的荧光偏振新方法，开发灵敏度更高、更方便快捷、可同时检测多种miRNA分子靶的血清学诊断新技术，提高肿瘤早期诊断的准确性，并研究生物样品中miRNA标志物准确量化结果与肿瘤发展之间的关系及对临床诊疗的潜在指导意义，为肿瘤的无损早期诊断及预后跟踪治疗提供可靠的实验支持与科学理论依据。

肿瘤的早期诊断和治疗是全世界都在关注的问题。研究发现miRNA的异常表达与很多重大疾病相关，被认为是一种新型生物标志物和潜在的治疗相关疾病生物靶点。灵敏、选择性、高效及快速检测MicroRNA，对疾病的早期诊断和治疗有重要意义。由于某些标志物丰度较低，在复杂基质中超灵敏检测标志物具有较大的挑战性。基于DNA-AgNPs、DNA-CuNPs纳米材料具有良好的生物相容性、水溶性、形成简单快速、荧光强度高等优势，该项目以DNA-AgNPs、DNA-CuNPs等新型荧光纳米材料为检测信号或平台，并与多种酶辅助放大方法结合，研究建立了多种用于外周循环血中标志物miRNA分子准确、灵敏、定量靶向诊断的应用基础研究，开发了灵敏度更高、更方便快捷的miRNA分子靶的血清学诊断新技术，提高肿瘤早期诊断的准确性；同时还建立了多种核酸酶、ATP及HIVDNA的灵敏检测方法，为肿瘤的无损早期诊断及预后跟踪治疗提供可靠的实验支持与科学理论依据。.项目执行期间，在国外SCI收录学术期刊上发表9篇研究论文，培养了8名硕士研究生，较好完成预期的研究的目标和任务。